最近分极性大的部位,用ODS分,然后各馏分在液相上显示分段效果很好,但是每一小段都有很多的峰,且很平均,看不到主峰,即使有的看得到,周围也有很多的小峰,最初打算用制备分,可是发现这些峰很难在C18柱上分开,即使时间拖的很长依然如此,可能这都是一些结够非常相似的化合物了,不知道接下来该怎么分了,凝胶作用也不好。由于这部分极性大,我不敢上硅胶柱。
不知道有没有人遇到过这种情况,请求帮忙。
按道理说极性大的应该量还可以的
你的样品那么平均 没有突出的成分
建议还是硅胶吧 洗脱的时候 氯仿甲醇水
分成几段以后再处理
ODS 半制备应该还可以处理的
纯化的过程就是损失的过程
个人建议
对于极性大的物质,除非你的硬件条件足够好,据我所知目前中科院大连理化所自己研发的一种反相填料,他说自己的比waters的反相柱效果好,也成功的用于天然药物的成功分离,对水溶性物质保留很好
但是一般的院校或研究所也就是制备液相、反相加凝胶吧,也只能这样去分了
楼主还是用反相继续纯化把,如果流份大概有两三个峰时在上制备,即便保留时间不长,两三个峰还是比较好分的
希望楼主能后续交流实验结果,本人目前也是再分大极性成分,多多交流
方法是对的,有问题的可能是你的硬件。
我和你的方法一样,但都是用的液相加色谱柱。
走了个梯度,ODS分段大极性组分出现了非常多的峰,通常都是峰连带他周围的小峰一起分取。
然后逐个组分的用制备液相加凝胶色谱柱来摸条件纯化。
LZ你说你用凝胶效果不好,是怎么个不好法?
凝胶效果不好,就是从第一瓶到最后一瓶点板都是一样的
楼主,我也是做极性大的东西,最近打算用ods,请问下ods的上样量多少?多少填料能上多少样品啊??还有你用的填料的具体型号方便告诉我么?就是孔径,粒径这些,万分感谢~
选择合适的流动相体系也是很重要的,楼主要多试。另外可以先用凝胶分再用CODS分离。结合一下也是很好的。另外推荐你试一下diol色谱柱。
不知道有没有人遇到过这种情况,请求帮忙。
按道理说极性大的应该量还可以的
你的样品那么平均 没有突出的成分
建议还是硅胶吧 洗脱的时候 氯仿甲醇水
分成几段以后再处理
ODS 半制备应该还可以处理的
纯化的过程就是损失的过程
个人建议
对于极性大的物质,除非你的硬件条件足够好,据我所知目前中科院大连理化所自己研发的一种反相填料,他说自己的比waters的反相柱效果好,也成功的用于天然药物的成功分离,对水溶性物质保留很好
但是一般的院校或研究所也就是制备液相、反相加凝胶吧,也只能这样去分了
楼主还是用反相继续纯化把,如果流份大概有两三个峰时在上制备,即便保留时间不长,两三个峰还是比较好分的
希望楼主能后续交流实验结果,本人目前也是再分大极性成分,多多交流
方法是对的,有问题的可能是你的硬件。
我和你的方法一样,但都是用的液相加色谱柱。
走了个梯度,ODS分段大极性组分出现了非常多的峰,通常都是峰连带他周围的小峰一起分取。
然后逐个组分的用制备液相加凝胶色谱柱来摸条件纯化。
LZ你说你用凝胶效果不好,是怎么个不好法?
凝胶效果不好,就是从第一瓶到最后一瓶点板都是一样的
楼主,我也是做极性大的东西,最近打算用ods,请问下ods的上样量多少?多少填料能上多少样品啊??还有你用的填料的具体型号方便告诉我么?就是孔径,粒径这些,万分感谢~
选择合适的流动相体系也是很重要的,楼主要多试。另外可以先用凝胶分再用CODS分离。结合一下也是很好的。另外推荐你试一下diol色谱柱。