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集中讨论HPLC中如何合理应用梯度洗脱

时间: 2012-06-22 04:57:16 作者: 来源: 字号:
在hplc梯度洗脱摸索的整个过程中,小虾我还是有点迷茫,知识不系统,故以此种方式与各位大虾共同整理一份材料。
望大家给出宝贵的意见,最后小虾定将大家的共同结晶汇总后展出,以方便更多需要的同僚。



我觉得梯度对于分离极性相差过大,用等度跑时间太长且极性小组分由于出峰过慢导致峰型不好或出峰太小的情况比较适合。用于梯度洗脱的溶剂,尽量选质量好的。
我也一直很想知道,如何设计梯度比较合理,不会出什么梯度溶剂峰。反正我是在洗脱过程中尽量不设计那种平衡的段(保持一个比例不变),都会把平衡的时间放在最后,感觉一平衡就开始基线上下波动了。所以如果峰都出来了,我就干脆不采集了,省得到后来图难看得很(当然一整个梯度还是要走完的)
个人意见,还请大家多多指教

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