由于本课题组无人做微生物次生代谢产物方面的实验，所以特向诸位大侠求助：
1、第一个实验是关于分代谢产物的，我现在发酵了104L，得到乙酸乙酯粗提物
仅13克，其中含有少量的氯化钠，由于样品太少，而且自己对这块也是新手，
准备按实验指导书上，进行硅胶柱分离，走传统方法。目标是把该菌株产生的 次生代谢产物尽可能多的都分离到，得到结构。
问题在于：
1）实验室目前实验设备不足，仅有三根柱子，导师让我看看缺什么，再买。我没有经验，希望各位 支支招？
2）和其他学校以同学讨论，她说，样品少的话，可以先上大孔树脂分段，然后液相看出峰条件，再用制备型液相收集样品，这样损失较少。不知道是否可行？
2、另一个实验是我固态发酵做的，粗品得到的也很少，是比较两中发酵方法的化合物产生情况不同，我想问问，如果不分单体的话，有没有好的办法能够说明化合物变化啊。
耐心看完，各位辛苦了，各位了！
无论如何，如果有HPLC的话，先把得到的粗物质分析一下。
你发酵的是真菌吧，其实粗物质的量不算少了。别人有发酵得到几g的。你的13g不少了。
我没有用过大孔树脂分过段，不过薄层层析柱色谱（短而且粗的硅胶柱）倒是很少的方法。
砍完段后，再用HPLC分析，能制备就直接制备，不能制备的在作进一步的分离。
楼主，核磁解析结构（平面和立体）是重点。
祝你好运。
你，我发酵的不是真菌，是粘细菌，由于实验室技术资源很少，没有人带，我们其他组有同学得到28克粗品，分的单体克数太少，都打不出谱，我有点怕。
13g应该不算少的，呵呵
不知道lz里面大概有多少个组分？以前做十几个发酵产物组分的时候有用过大孔树脂分段，梯度洗脱就能分段了，HPLC可以检测分段效果，然后在过硅胶柱粗分，要是组分多而且极性相近的话建议lz你买细的硅胶，耗时一点没关系，
如果不需要分离单体的话HPLC不是就可以看出相对变化么？或者你做个标准曲线神马的也可以看绝对的啊，要是有条件做个LC-MS就更好了呢！我看别人探索发酵条件一般就用HPLC就够了呢。
恩，你啊，我准备下周用硅胶柱分段，目前试了展层效果最好的是氯仿：甲醇=8:1，有七个点，分布比较匀称，石油醚：乙酸乙酯=1:1，有5个点，三个靠近点样点，一个靠近展层剂边缘下方，由于看别人说，好像最好用石油醚体系是吗？说氯仿刺激性比较大，不知道怎么选啊？恳请指教！
客气了，几种常用洗脱体系极性，石油醚<二氯乙烷＜三氯甲烷＜乙酸乙酯＜甲醇＜水，石油醚/乙酸乙酯体系极性范围是比二氯甲烷（三氯甲烷）/甲醇体系小的，我也是用的CHCl3：CH3OH的，因为产物极性较大PE,EA系统估计没法洗脱下来，也可以试试，CHCl3是比较毒，可以换CHCl2试试呢，至于怎么分段的话就要各种探索了，加上HPLC检测应该没有问题的，呵呵
1、第一个实验是关于分代谢产物的，我现在发酵了104L，得到乙酸乙酯粗提物
仅13克，其中含有少量的氯化钠，由于样品太少，而且自己对这块也是新手，
准备按实验指导书上，进行硅胶柱分离，走传统方法。目标是把该菌株产生的 次生代谢产物尽可能多的都分离到，得到结构。
问题在于：
1）实验室目前实验设备不足，仅有三根柱子，导师让我看看缺什么，再买。我没有经验，希望各位 支支招？
2）和其他学校以同学讨论，她说，样品少的话，可以先上大孔树脂分段，然后液相看出峰条件，再用制备型液相收集样品，这样损失较少。不知道是否可行？
2、另一个实验是我固态发酵做的，粗品得到的也很少，是比较两中发酵方法的化合物产生情况不同，我想问问，如果不分单体的话，有没有好的办法能够说明化合物变化啊。
耐心看完，各位辛苦了，各位了！
无论如何，如果有HPLC的话，先把得到的粗物质分析一下。
你发酵的是真菌吧，其实粗物质的量不算少了。别人有发酵得到几g的。你的13g不少了。
我没有用过大孔树脂分过段，不过薄层层析柱色谱（短而且粗的硅胶柱）倒是很少的方法。
砍完段后，再用HPLC分析，能制备就直接制备，不能制备的在作进一步的分离。
楼主，核磁解析结构（平面和立体）是重点。
祝你好运。
你，我发酵的不是真菌，是粘细菌，由于实验室技术资源很少，没有人带，我们其他组有同学得到28克粗品，分的单体克数太少，都打不出谱，我有点怕。
13g应该不算少的，呵呵
不知道lz里面大概有多少个组分？以前做十几个发酵产物组分的时候有用过大孔树脂分段，梯度洗脱就能分段了，HPLC可以检测分段效果，然后在过硅胶柱粗分，要是组分多而且极性相近的话建议lz你买细的硅胶，耗时一点没关系，
如果不需要分离单体的话HPLC不是就可以看出相对变化么？或者你做个标准曲线神马的也可以看绝对的啊，要是有条件做个LC-MS就更好了呢！我看别人探索发酵条件一般就用HPLC就够了呢。
恩，你啊，我准备下周用硅胶柱分段，目前试了展层效果最好的是氯仿：甲醇=8:1，有七个点，分布比较匀称，石油醚：乙酸乙酯=1:1，有5个点，三个靠近点样点，一个靠近展层剂边缘下方，由于看别人说，好像最好用石油醚体系是吗？说氯仿刺激性比较大，不知道怎么选啊？恳请指教！
客气了，几种常用洗脱体系极性，石油醚<二氯乙烷＜三氯甲烷＜乙酸乙酯＜甲醇＜水，石油醚/乙酸乙酯体系极性范围是比二氯甲烷（三氯甲烷）/甲醇体系小的，我也是用的CHCl3：CH3OH的，因为产物极性较大PE,EA系统估计没法洗脱下来，也可以试试，CHCl3是比较毒，可以换CHCl2试试呢，至于怎么分段的话就要各种探索了，加上HPLC检测应该没有问题的，呵呵