我做的是乙醇提取物,想知道乙醇提取物中的组成成分,所以要做一个LC-TOF,老师说,要先做一个高效液相,才能确定LC-TOF的条件,我的乙醇提取物都是冷冻干燥的干品,
我的问题是:
一、我用洗脱液溶解啊,还是用乙醇溶解,洗脱液准备选用乙腈,
二、我这个有没有必要做梯度洗脱;
三、如果用梯度洗脱,我选用乙腈-水,用调节PH吗,我查资料有点直接用乙腈-水,有的用的乙腈和缓冲液,这个PH是不是根据自己样品的pH调的(我用的是常规的C18柱,是不是PH调在3-7之间都行啊)
由于没做过,一点不懂,希望做过的和知道的朋友不吝指教
[ 来自科研家族 天然产物家族 ]
1用乙腈溶解样品
2没必要进行梯度洗脱
3不用调节pH值
具体的不懂再问哈不懂得
1、洗脱液(流动相)溶解,可减少溶剂效应
2、可以梯度,也可不走梯度,梯度便于杂质分离
3、如果只用乙腈和水作流动相,调pH没啥必要,如果使用缓冲液溶液,可以调ph
样品最好用流动相来溶。
用不用梯度洗脱是要根据你的样品来决定的。如果组分较多且极性相差很大的话,用等度消耗时间较长且分离效果不好的话,肯定是要用梯度
用不用调节pH也是根据你的样品决定的,调节pH的主要作用就是改善峰型和保证样品的稳定。
你初次接触的话,给你一个建议,就是多查些相关文献,然后照着文献条件来摸索,比较有效率。另外流动相体系里不要含有无机盐,不然无法应用于液质。
建议你先点个薄层板,看你的样品纯度。
再确定是否可以用梯度洗脱
1、样品最好用洗脱液(流动相)溶解,可减少溶剂效应
2、液相可以梯度,也可不走梯度,梯度便于杂质分离,乙腈和水作流动相,调pH没啥必要有盐的话要调节
流动相自己选,没有必要非得用乙腈,乙腈毒性有点大,可以用甲醇或乙醇作与水作流动相。梯度洗脱是根据产品成分来的,如果你的样品极性相似,结构差不多,就是梯度洗脱也有点难搞了,关键是选择合适的流动相,和控制流速就可以了。
我的问题是:
一、我用洗脱液溶解啊,还是用乙醇溶解,洗脱液准备选用乙腈,
二、我这个有没有必要做梯度洗脱;
三、如果用梯度洗脱,我选用乙腈-水,用调节PH吗,我查资料有点直接用乙腈-水,有的用的乙腈和缓冲液,这个PH是不是根据自己样品的pH调的(我用的是常规的C18柱,是不是PH调在3-7之间都行啊)
由于没做过,一点不懂,希望做过的和知道的朋友不吝指教
[ 来自科研家族 天然产物家族 ]
1用乙腈溶解样品
2没必要进行梯度洗脱
3不用调节pH值
具体的不懂再问哈不懂得
1、洗脱液(流动相)溶解,可减少溶剂效应
2、可以梯度,也可不走梯度,梯度便于杂质分离
3、如果只用乙腈和水作流动相,调pH没啥必要,如果使用缓冲液溶液,可以调ph
样品最好用流动相来溶。
用不用梯度洗脱是要根据你的样品来决定的。如果组分较多且极性相差很大的话,用等度消耗时间较长且分离效果不好的话,肯定是要用梯度
用不用调节pH也是根据你的样品决定的,调节pH的主要作用就是改善峰型和保证样品的稳定。
你初次接触的话,给你一个建议,就是多查些相关文献,然后照着文献条件来摸索,比较有效率。另外流动相体系里不要含有无机盐,不然无法应用于液质。
建议你先点个薄层板,看你的样品纯度。
再确定是否可以用梯度洗脱
1、样品最好用洗脱液(流动相)溶解,可减少溶剂效应
2、液相可以梯度,也可不走梯度,梯度便于杂质分离,乙腈和水作流动相,调pH没啥必要有盐的话要调节
流动相自己选,没有必要非得用乙腈,乙腈毒性有点大,可以用甲醇或乙醇作与水作流动相。梯度洗脱是根据产品成分来的,如果你的样品极性相似,结构差不多,就是梯度洗脱也有点难搞了,关键是选择合适的流动相,和控制流速就可以了。