我想请问，多糖在用柱层析纯化时，文献上都说用苯酚硫酸法检测，直到检测不出多糖停止收集，洗脱峰也根据硫酸苯酚法的吸收值来画。那用苯酚硫酸检测的时候是和做标准曲线一样的方法吗？也是取2mL多糖，加1ml苯酚，5mL浓硫酸？

您为什么不用示差来检测啊？

柱色谱按时间收集的组分也是按相应的苯酚硫酸法测定。
但是多糖溶液的用量不一定非要2ML
如果收集时间间隔短，可能收集不到2ml，可以加蒸馏水到2ml后再测定
如果多于2ml，可以吸取部分加蒸馏水定容或者直接吸取2ml
不过最好还是用示差检测，得到的数据比较稳定

因为没有仪器啊


还有一个问题，请问在做多糖洗脱曲线的时候一般不是以管数为横坐标，吸光度为纵坐标吗，如果加蒸馏水稀释的话做的是不是就不准确了呢？

管数、时间都可以作为横坐标
加蒸馏水稀释可以换算成原始的值，如果操作没有问题的话不会有误差。

我做过多糖的测定，做标曲和样品含量测定时的比例必须一样，不过反应量不用那么大啊，浓硫酸用多了也危险的。
特别注意的是实验操作一定要同一个人来做，减少实验误差，浓硫酸的加入速度也不能太快，否则实验很不准，要缓慢加入。







0.2ml糖0.4ml6%苯酚1ml浓硫酸肉眼观察足以


你好！示差检测多糖准确么？