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问一个关于凝胶的基础问题

时间: 2012-06-16 05:57:16 作者: 来源: 字号:
小弟实验室里经常使用TSK-GEL ODS系列凝胶色谱柱细分纯化,但从未使用过葡聚糖凝胶Sephadex此类填料。
很菜的问题,献上金币50枚求解答。
1.TSK-GEL ODS又是凝胶,又是ODS的,到底是怎样一个洗脱机制?
2.TSK-GEL ODS这样的色谱柱虽然和Sephadex是两种东西,但是否肤浅的存在着如同ODS色谱柱和反相硅胶层析柱那样加压柱子和常压填料的关系?

lz提到的凝胶没有接触过,但是Sephadex(lh-20)倒是很常用

Sephadex(lh-20,还有其他型号,这个比较常用)当使用小极性流动相(氯仿:甲醇=1:1)是只是分子筛原理,除杂,除色带效果叫明显,当然对一些特定的物质如黄酮,分离效果也是非常明显,如果量大且较为单一的话,很可能直接拿到单体
如果使用大极性流动相(甲醇)不仅有分子筛作用还有反相吸附作用,大极性的先出来小极性后出来,如果有必要可以进行梯度洗脱(甲醇:水),我没有试过,但是原则上是可以的
Sephadex(lh-20)总体还是很好用,流动相选择多,三相的氯仿甲醇水我都上过柱
lz最后说的加压常压那点是什么意思啊?


加压就是液相仪啊,常压就是柱层析。
因为论坛中很多大侠似乎用的凝胶都是填料.............我没用过,用的都是hplc色谱柱,这是经济上的问题还是说大侠们确实有目的用到诸如Sephadex这类的填料?
小弟初学中,很疑惑。


当然是有目的的啊老兄

你说的加压就这意思啊,液相那肯定是高压液相了,过层析柱也经常需要加压的啊,我经常用氮气瓶加压,很猛烈的,有些实验室用鱼泵,鱼泵劲儿他笑了,常压用的不多,因为我用的硅胶是薄层硅胶,所以基本都加压,如果是粗一点硅胶可以不加压,但是柱效相对低些

用Sephadex的目的大部分是除杂,tlc板子上的条带一般都有很好的效果,Sephadex虽然比较贵,但是可以多次重复使用,我们这个都用2年了,平时注意保养就可以,不是出于经济上的什么考虑


请教大虾,葡聚糖凝胶装柱子怎么样做分级接收?我看有很多人用的是自动接收器,做柱层析需要吗?


过凝胶一般都用自动接收器

柱层析?硅胶柱层析?不用自动接收器,拿瓶子接


另外请教,现在用DEAE-纤维素纯化,上玻璃柱,有关填料用量与所上样品的量之间该怎么样处理,还有这种填料装柱前预处理和装柱要求该怎么样。还有怎么样解决洗脱慢这个问题?需要做分级接收吗?了。


惭愧了,这个俺也莫有接触过

DEAE-纤维素纯化多糖吧
http://www.docin.com/p-53896285.h这种柱的特点是柱效低分离时间超长,我今本用DEAE-SEPHAROSE FAST FLOW 几个小时就分完了


朋友你好,请教你个问题,DEAE纤维素柱一般分离多糖时的吸附载量大概多少啊,我要用到DEAE Sepharose fast flow分离多糖,不知道该用多少填料,1ml填料大概能吸附多少糖呢?请不吝赐教,了!

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