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聚酰胺柱内的保留体积与柱体积的区别

时间: 2012-06-15 19:57:16 作者: 来源: 字号:
小生在看实验指导时有些疑问,请给以指导。
实验操作如下
装柱:称取色谱用聚酰胺6克,置200ml烧杯中,加蒸馏水100ml轻轻摇匀,放置过夜,使之充分膨胀。装柱前轻轻搅动并倾去上层混浊液,下层再加蒸馏水复洗两次(注意计算水量,以计算柱内保留体积)。将洗好的聚酰胺连水一次倒入已处理好的柱内,打开下口开关,让水缓缓流出,在吸附剂下沉的同时,可用橡皮塞对称轻轻敲击色谱柱,使吸附剂装填均匀。待液面降至吸附剂顶部1厘米处时,关住下口,量取流出体积,求出柱内保留体积,并以此确定开始收集洗脱液的时间。然后依次用100ml95%乙醇和150ml蒸馏水按4-5ml/min的流速过柱,待最后通过柱的蒸馏水在吸附剂上端约1厘米时,关住下口,上样。

请问,柱内保留体积和收集洗脱液的时间有什么关系?、
进行梯度洗脱时,每个梯度洗脱液一般是2到三倍柱体积。那么,柱内保留体积和柱体积有什么区别?、








柱体积就是指这个柱所占有的溶液体积,你加入的蒸馏水体积减去流出的水体积,得出的就是柱体积。

保留体积是针对你分离的化合物而言的,就像HPLC等大家熟知的色谱也有保留时间这一说,保留体积=流速*保留时间

你所说的柱内保留体积和柱体积应该是一回事吧


我也觉得是一回事

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