本人最近在制备一个三萜类化合物，用的紫外检测器（210nm），在液相上显示一个峰，但是在正相板上点板是两个峰，而且两峰Rf值将近0.2的差距。（见图）最左边C为制备后的纯品。请各位指教一下！


各位，我原来用的是示差检测器，没出现过类似情况，但我现在做实验这里只有紫外检测器，所以出现了这个问题，我当时回针检测纯度时还是一个，估计另一个紫外下没吸收，所以看不出来。但昨天谱打出来，挺干净的，里面有羧基，含糖。分子量564.

有可能是其中一个化合物没有紫外吸收（210也没有），所以只有在正相板显色才能看见。建议做HPLC的时候用ELSD检测器。

液相单峰不一定就是纯品。因为你是一个固定波长下的情况，如果有DAD检测器就好了。

同系物，尤其相差一个甲基的，在HPLC上会出现一个峰，多肽类化合物分析中会经常出现这种情况的，

是你的HPLC分辨率不够高吧？正如上面老兄所说，分子量接近，极性接近的物质不好分离，建议你走一下质谱，找出结构差别来，在构建一个好的分离方法

换正相色谱方法，最好是使用ELSD检测，应该有个不同的结果。
做LC-MS或使用DAD检测器查看峰纯度，若峰不纯，就可以解释了。







既然在正相上能看出是两个点，相差0.2是可以分离的，使用正相干柱分离，硅胶用硅胶H装柱。

建议采用示差检测器与ELSD检测器分别试一试，进行比较，这种情况对于接近末端吸收的样品是有可能的

210nm下，可能另一个峰没有吸收或吸收极低，致使响应值太低。

最好做个氢谱证实一下是否为混合物。要是的，肯定是其中一个无UV，HPLC检测不到。

说明这两个化合物的分子量差别不是很大，还有就是极性相近，
对于这样情况，极其不好分离，TLC差距为0.2，HPLC为一个峰，
对于现代的分离技术来说却是比较难些，这是个难题···
建议你可以查找相关的文献，

用蒸发光检测器梯度洗脱一次，您就会发现是多个峰！

图咧？我觉得你正相板两个峰，如果排除了其他溶剂不干净、样品在该系统不稳定等的因素，那么你的样品很有可能就是两个成分。不知道你液相试了几个流动相系统，要是只有一个的话结构物质很有可能就在同一时间出峰了。