请问用苯酚硫酸法测多糖时,配制的空白溶液是无色的还是有跟要检测的含多糖的溶液的颜色差不多?最近纠结于为什么有时配的溶液是无色的 有时又有点橙色。
还有就是想知道苯酚硫酸法配制溶液的时候的注意事项?
你的标准溶液里有稍微的橙色会不会是不小心进去了些糖?或者是硫酸的问题,标准对照应该是用水+苯酚溶液+硫酸即可,对于有色素的多糖来说我们一般是直接拿未反应的多糖溶液在这个波长下进行测定获得相应的吸收值,然后在测定完全部的数据后将反应的多糖样品数据中扣除这个数就可以了
做苯酚硫酸法最重要的就是样品一定要干燥并且溶解时要全溶,要先真空干燥再溶解,必要时可以用超声加速溶解,加苯酚溶液时注意室温是多少,因为有时室温太低苯酚溶液里的苯酚会析出,溶液浓度不均匀影响结果
好象是差不多
没关系的,因为是空白,即使有色测其他样品时也会暗含这个吸光度,从而都加相当于都没加。没有影响。。我也经常遇到空白有色现象。
苯酚很容易氧化,配置苯酚时要注意。
那到底应该是什么颜色的 我有时做的是橙色,有时又是无色的,按理说没有糖进去,我很奇怪的一个问题是,我提取的明明是多糖,可是为什么还是不能全溶于水呢,我甚至都超声过了。还有我想,有时苯酚配好后会放一段时间 ,最近做的时候室温大概也就25度左右,苯酚的问题吗?
苯酚放置过夜后还能用吗
问题是 有时候空白的颜色比我加糖的颜色都要深了 如果是无色的 那测得的吸光度自然很大 含量会很高 误差很大很大的
出现橙色的原因可能是苯酚或硫酸被污染了,提取多糖的时候拿到固体醇沉的时候,不溶性的物质可能被多糖包裹同时沉了下来,粗多糖有不溶性的物质是正常的。
空白液是为了测定吸光度时需要减掉的背底。
还有就是想知道苯酚硫酸法配制溶液的时候的注意事项?
你的标准溶液里有稍微的橙色会不会是不小心进去了些糖?或者是硫酸的问题,标准对照应该是用水+苯酚溶液+硫酸即可,对于有色素的多糖来说我们一般是直接拿未反应的多糖溶液在这个波长下进行测定获得相应的吸收值,然后在测定完全部的数据后将反应的多糖样品数据中扣除这个数就可以了
做苯酚硫酸法最重要的就是样品一定要干燥并且溶解时要全溶,要先真空干燥再溶解,必要时可以用超声加速溶解,加苯酚溶液时注意室温是多少,因为有时室温太低苯酚溶液里的苯酚会析出,溶液浓度不均匀影响结果
好象是差不多
没关系的,因为是空白,即使有色测其他样品时也会暗含这个吸光度,从而都加相当于都没加。没有影响。。我也经常遇到空白有色现象。
苯酚很容易氧化,配置苯酚时要注意。
那到底应该是什么颜色的 我有时做的是橙色,有时又是无色的,按理说没有糖进去,我很奇怪的一个问题是,我提取的明明是多糖,可是为什么还是不能全溶于水呢,我甚至都超声过了。还有我想,有时苯酚配好后会放一段时间 ,最近做的时候室温大概也就25度左右,苯酚的问题吗?
苯酚放置过夜后还能用吗
问题是 有时候空白的颜色比我加糖的颜色都要深了 如果是无色的 那测得的吸光度自然很大 含量会很高 误差很大很大的
出现橙色的原因可能是苯酚或硫酸被污染了,提取多糖的时候拿到固体醇沉的时候,不溶性的物质可能被多糖包裹同时沉了下来,粗多糖有不溶性的物质是正常的。
空白液是为了测定吸光度时需要减掉的背底。