我要从乙酸乙酯相分黄酮，采用硅胶柱层析法，要用三种溶剂组成的洗脱剂进行梯度洗脱，请问该如何调节各溶剂的比例？有什么规律吗？

乙酸乙酯层的东西，粗分的话，氯仿甲醇系统就足以。没必要三项。
倘若细分的话，加点甲酸就行了，至于用酸量的大小，这个得靠薄层版预判。


我用硅胶薄层层析法，试过只用氯仿-甲醇做展开剂，根本分不开，一个点也没有，所以只能选三种了。

调极性，可以从小到大的慢慢配，甲醇-三氯甲烷-冰乙酸，苯-三氯甲烷-甲酸加算跑的点会集中很多 试过的！

我建议你先用两相系统砍段，然后合并后每个组分就可以用等度了，一般等度比较好控制，效果较好