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反相C18层析柱怎样装柱,使用的问题

时间: 2012-06-13 04:27:16 作者: 来源: 字号:
各位:我准备使用C18反相填料柱层析分离,但不知道怎样处理填料,装柱,上样和洗脱,使用普通玻璃柱是否可行,求大侠帮助一下哈?越详细越好,多谢多谢啦
洗脱时可以用水直接冲吗?大家啦

我们买的C18反相填料是用80%甲醇搅匀,上到玻璃柱上,如果你的压力太大,不能用玻璃的,最好不要用水冲,这个需要你问下供应商,有的用水冲会导致填料上基团的塌陷,小心点的话,至少5%甲醇,最高就用80%甲醇,如果想不在这个范围,可以问问供应商。质量好的,可以水冲,甲醇冲得吧。

C18反相填料柱层析分离,先用甲醇处理填料、装柱(可以使用普通玻璃柱装柱),用较低浓度的甲醇水溶液平衡柱子,再上样、洗脱。


大虾,那上样量有规定吗

一. 操作步骤:
用反相板点板确定洗脱比例(必要的时候用梯度洗脱)
样品过滤
甲醇冲洗柱子
用水冲洗柱子
用尽量少的溶剂溶解样品,上样.
用已经确定好的洗脱剂洗脱
甲醇冲洗柱子

二 注意事项:
1.一般只用“甲醇-水”系统
2.梯度洗脱时一定要从极性大的逐步换到小极性的溶剂.
3.不要让柱子干掉,要让其完全浸泡在溶剂之中。
3.溶剂极性转换时跨度不宜过大,以免放热产生气泡.
4. 反相柱的装填一般用甲醇装柱,有条件的话可以尽可能的在高流速下压一下柱床,这样柱效好一些。

反相柱色谱填料最好先用甲醇浸泡装柱,然后用甲醇洗脱2-3个保留体积,再用水置换出甲醇备用







我也想做个C18的层析柱,请问下斑竹在哪买的填料?多少钱?


我们买的YMC C18100克1200元

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