我的一个微生物发酵样品，从中压反向RP-18柱30%甲醇组分下来的，再过了一次中压反向后，合并分到一个组分，只溶于水，不溶于甲醇，丙酮，乙酸乙酯，但是TLC板上用氯仿：甲醇20:1展层有主点，而且Rf值0.6左右。怀疑是糖苷类的东西。请各位支个招，下一步怎么分离纯化比较好？

20:1能展开，，

你说说的不溶于乙酸乙酯，丙酮，甲醇？

这个成分有很大的疑问，

HPLC检测过没？

糖苷类的
那就继续反相分离，
从5%甲醇-40%，梯度继续洗脱

我也是做微生物发酵分离的，昨天刚刚发酵结束，抽滤后，菌丝体与发酵液分离了，发酵清液大约有80L，请问你是如何浓缩发酵液的，是通过旋蒸浓缩水，还是直接用乙酸乙酯萃取三次的啊…我想浓缩到20L再萃取，不知道那种方法，简便快捷…急，求解……

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看来极性大，选择适当的树脂来分。

本人刚开始接触分离纯化,不知道怎么从花蜜中提取生物碱,是要用有机酸来提取吗>如果是那么请问是什么比例呢?麻烦路过的各位大侠支个招,了..


，我是用固体发酵的。直接浸泡，萃取，旋蒸。


那你可是有福了，没有水，我这全是水相啊，80L啊，旋蒸不是办法，而且容易破坏化合物结构，我就只有硬萃取了。。不过每次萃取 ，几乎都没有颜色啊，唉，水相颜色深的很啊。。。。。。可惜了。。

水溶性较大的物质，既然你已经使用反相了，就试试亲水的C18吧，对水溶性好的物质保留较强，可能比普通的C18效果会好


可以试试大孔吸附树脂来富集浓缩