植化薄层板摸好洗脱条件后,上柱时 洗脱液是否要稀释一倍(听别人说的,不知为什么)
比如 在薄层板摸得是石油醚:丙酮(2:1)上柱后是否要稀释一倍石油醚:丙酮(4:1)
怎么会是这样呢,一般膜系统时就是Rf=0.15-0.2之间就可以了,跑板是什么就用什么系统冲柱子就是了,不理解稀释为何?
不一定,我的薄层板上10:1展起,柱子上7:1才下,这和柱子装的好坏有关,可能是我的柱子没装好,我认为稍微小一点就可以了
我就是和一楼一样的 在rf0.2-0.3之间 然后就用这个比例冲柱 也是不理解为何要稀释 我只是听别人说要稀释
别人所说的稀释1倍只是让你从分离比较好的展开条件转换成上柱子的洗脱条件,因为你看几个点分离的怎么样,Rf值大概在0.5到0.6,稀释一倍以后展开剂极性下降,RF值差不多也会减少一半,然后微调一下就差不多到0.2
薄层板和柱子还是有一定区别的,在你还不是非常确定条件时,最好先稀释一倍上柱,看下分离效果,再做调整,要是直接用薄层条件的话,就怕极性太大,一下全冲下来了
不管你是什么条件,最好都稀释?倍,采取梯度洗脱是毫无问题。
比如 在薄层板摸得是石油醚:丙酮(2:1)上柱后是否要稀释一倍石油醚:丙酮(4:1)
怎么会是这样呢,一般膜系统时就是Rf=0.15-0.2之间就可以了,跑板是什么就用什么系统冲柱子就是了,不理解稀释为何?
不一定,我的薄层板上10:1展起,柱子上7:1才下,这和柱子装的好坏有关,可能是我的柱子没装好,我认为稍微小一点就可以了
我就是和一楼一样的 在rf0.2-0.3之间 然后就用这个比例冲柱 也是不理解为何要稀释 我只是听别人说要稀释
别人所说的稀释1倍只是让你从分离比较好的展开条件转换成上柱子的洗脱条件,因为你看几个点分离的怎么样,Rf值大概在0.5到0.6,稀释一倍以后展开剂极性下降,RF值差不多也会减少一半,然后微调一下就差不多到0.2
薄层板和柱子还是有一定区别的,在你还不是非常确定条件时,最好先稀释一倍上柱,看下分离效果,再做调整,要是直接用薄层条件的话,就怕极性太大,一下全冲下来了
不管你是什么条件,最好都稀释?倍,采取梯度洗脱是毫无问题。