采用硅胶柱色谱法从半年分一个化合物到一个月分8个的分离纯化经验之谈，这是切身的体会，可能对，也可能不对。希望大侠些多多指教。
（1） 样品编号：做到见到样品编号就知道化合物在哪个部位出来。即按极性大小以1开始往下编，若是往下细分、合并后加以-字母，进一步细分再加阿拉伯数字脚注标示，依次类推。
（2） 分离顺序：按极性从小到大的顺序分离，能体会到样品极性的逐渐增大，便于调整样品洗脱系统。
（3） TLC条件：多采用三相系统跑板，寻找合适的显色剂，使TLC板出现现可谓“色彩斑斓”现象，极性相似的化合物在TLC显现差异，便于指导洗脱系统的选择。
（4） 洗脱系统：多采用三相系统，容易析出晶体，容易将极性相似类型不同的化合物分离，便于进一步纯化。
（5） 梯度选择：采用“小步快跑”法，即七八个梯度，每个梯度3~5个柱体积跑一根小柱，中间不停，一天跑完。
（6） 分离原则：不能只“分”不“合”，要懂得“攒”，通过TLC图谱，合并相似斑点流分，再细分，把相同斑点的流分攒在一起后纯化。
（7） 空白硅胶：样品与拌样硅胶1:1左右，若样品较粘，扩大到1:2，空白硅胶5~8g，多用直径为1.6cm的色谱柱，试剂用量少，分离效果也不错，特别便于1g以下样品的分离。
（8） 接样方法：在快出主要斑点的时候，采用5ml的小瓶接流分，自然挥干，此时样品浓度较大，便于观察样品是否析出晶体。主斑点之前之后的流分采用100ml的具塞三角瓶接，溶剂可回收反复使用。
都OUt了，效率是关键！我们采用高压制备色谱，从建立方法到制备出几十毫克样品，最多的时候一天可以分20几个样品一台机子。而且高压制备是高通量筛选、制备，只要分析上能分得开，高压近乎重现制备
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楼主，请问您的洗脱液溶剂回收后反复使用，那么三相的比例有没有变化呢？极性还是以前配置的时候那样大小呢？我一直不敢使用回收后的三相。。。
楼主，我对三相展开剂不熟悉，大概是怎么配比呢
不错的经验，不过有经费的话，用中压制备液相更快！人更省力
谢谢，真不错
极性可能会发生变化。我采用用的办法是：用得是具塞锥形瓶接的，一接完样就塞上塞子，当天常压蒸馏回收，及时转入带盖瓶中。从使用的情况来看，极性变化不大。
通常是固定极性小的，同时动后两项。假如：你的样品用石油醚乙酸乙酯丙酮系统4：1：1：2滴甲酸（根据你样品情况决定是否加），在TLC板上，Rf值大约0.4，主斑点可能在100：6：6~10：1：1之间出来，在之前设3个梯度，每个梯度3个柱体积，到了100：6：6，100：7：7，100：8：8，100：9：9，就每个梯度5~8个柱体积，千万别拖。当然得边洗脱边跑板跟踪主斑点，如果该梯度没有出现，赶快换下一个梯度。第一次使用这种系统，得摸索体会。为下一次做好设计准备。不知道说清楚没有？
要记住出主斑点得时候是现配现用，不回收，用得是5ml注射瓶接样的，自然挥干，第二天来观察瓶中是否结晶。
感谢LZ分享经验了受教
（1） 样品编号：做到见到样品编号就知道化合物在哪个部位出来。即按极性大小以1开始往下编，若是往下细分、合并后加以-字母，进一步细分再加阿拉伯数字脚注标示，依次类推。
（2） 分离顺序：按极性从小到大的顺序分离，能体会到样品极性的逐渐增大，便于调整样品洗脱系统。
（3） TLC条件：多采用三相系统跑板，寻找合适的显色剂，使TLC板出现现可谓“色彩斑斓”现象，极性相似的化合物在TLC显现差异，便于指导洗脱系统的选择。
（4） 洗脱系统：多采用三相系统，容易析出晶体，容易将极性相似类型不同的化合物分离，便于进一步纯化。
（5） 梯度选择：采用“小步快跑”法，即七八个梯度，每个梯度3~5个柱体积跑一根小柱，中间不停，一天跑完。
（6） 分离原则：不能只“分”不“合”，要懂得“攒”，通过TLC图谱，合并相似斑点流分，再细分，把相同斑点的流分攒在一起后纯化。
（7） 空白硅胶：样品与拌样硅胶1:1左右，若样品较粘，扩大到1:2，空白硅胶5~8g，多用直径为1.6cm的色谱柱，试剂用量少，分离效果也不错，特别便于1g以下样品的分离。
（8） 接样方法：在快出主要斑点的时候，采用5ml的小瓶接流分，自然挥干，此时样品浓度较大，便于观察样品是否析出晶体。主斑点之前之后的流分采用100ml的具塞三角瓶接，溶剂可回收反复使用。
都OUt了，效率是关键！我们采用高压制备色谱，从建立方法到制备出几十毫克样品，最多的时候一天可以分20几个样品一台机子。而且高压制备是高通量筛选、制备，只要分析上能分得开，高压近乎重现制备
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楼主，请问您的洗脱液溶剂回收后反复使用，那么三相的比例有没有变化呢？极性还是以前配置的时候那样大小呢？我一直不敢使用回收后的三相。。。
楼主，我对三相展开剂不熟悉，大概是怎么配比呢
不错的经验，不过有经费的话，用中压制备液相更快！人更省力
谢谢，真不错
极性可能会发生变化。我采用用的办法是：用得是具塞锥形瓶接的，一接完样就塞上塞子，当天常压蒸馏回收，及时转入带盖瓶中。从使用的情况来看，极性变化不大。
通常是固定极性小的，同时动后两项。假如：你的样品用石油醚乙酸乙酯丙酮系统4：1：1：2滴甲酸（根据你样品情况决定是否加），在TLC板上，Rf值大约0.4，主斑点可能在100：6：6~10：1：1之间出来，在之前设3个梯度，每个梯度3个柱体积，到了100：6：6，100：7：7，100：8：8，100：9：9，就每个梯度5~8个柱体积，千万别拖。当然得边洗脱边跑板跟踪主斑点，如果该梯度没有出现，赶快换下一个梯度。第一次使用这种系统，得摸索体会。为下一次做好设计准备。不知道说清楚没有？
要记住出主斑点得时候是现配现用，不回收，用得是5ml注射瓶接样的，自然挥干，第二天来观察瓶中是否结晶。
感谢LZ分享经验了受教