各位虫友们。现在我在跑的是水相,先过了根大孔树脂柱,用水把糖都冲出来了,后面又用10%乙醇和50%乙醇冲洗。现在分为三个部分—纯水部(非糖)、10%乙醇、50%乙醇。最近我在跑纯水部分(非糖),用的是硅胶柱,流动相从10:1氯仿甲醇冲到3:1氯仿甲醇。但是几乎冲不下来东西。我现在怎么办啊?已经过了三个星期了。大家救救我吧!!!
那么大极性的东西,用硅胶分难度太大了,难免死吸附。分离皂苷的话还得加点水,不能单纯有机相。水层的应该更不好分。试试含水系统吧。另外加水不是把硅胶洗下来,而是大量水会使硅胶失活,变成分配色谱。
水里应该是没有东西吧,应该是在醇里,跑个板试试里边有没有东西先
你是怎么样上样的?不会直接把水相加进去了吧
我还是和硅胶拌样一起上的
首先你冲出的部分是溶于水的,极性比较偏大,氯仿甲醇3:1的极性不是很大,你试试把甲醇加大比例看看,不用太担心了,只要不是那种吸附在硅胶上不下来的物质都能被冲出来,但是要尽快冲,时间越长吸附越大!
同意楼上,估计你跑的那个极性比较大,应当提高甲醇比例
水下来的东西一般是不做的,应为其在液相上也几乎没有保留,你有特殊目的吗?
纯水部分极性很大,你用氯仿甲醇很难冲下来的,硅胶上面会吸附掉很多样品。洗脱剂里面要加水,甲醇比例也还要调大
没有特殊的目的,我是第一次做,开始用10:1氯仿甲醇跑了板,rf在0·2,就上了样,结果就这样了。
加水的话,不是会把硅胶融下来吗?
那么大极性的东西,用硅胶分难度太大了,难免死吸附。分离皂苷的话还得加点水,不能单纯有机相。水层的应该更不好分。试试含水系统吧。另外加水不是把硅胶洗下来,而是大量水会使硅胶失活,变成分配色谱。
水里应该是没有东西吧,应该是在醇里,跑个板试试里边有没有东西先
你是怎么样上样的?不会直接把水相加进去了吧
我还是和硅胶拌样一起上的
首先你冲出的部分是溶于水的,极性比较偏大,氯仿甲醇3:1的极性不是很大,你试试把甲醇加大比例看看,不用太担心了,只要不是那种吸附在硅胶上不下来的物质都能被冲出来,但是要尽快冲,时间越长吸附越大!
同意楼上,估计你跑的那个极性比较大,应当提高甲醇比例
水下来的东西一般是不做的,应为其在液相上也几乎没有保留,你有特殊目的吗?
纯水部分极性很大,你用氯仿甲醇很难冲下来的,硅胶上面会吸附掉很多样品。洗脱剂里面要加水,甲醇比例也还要调大
没有特殊的目的,我是第一次做,开始用10:1氯仿甲醇跑了板,rf在0·2,就上了样,结果就这样了。
加水的话,不是会把硅胶融下来吗?