这个问题已经困扰我两个月之久。我现在做的正丁醇部分中C-M 7:1 正相洗脱的粗组分。具体的做法就是中压反相ODS划段：0，30,50,70,100%。然后每个段再用反相细分，结合凝胶。如0,5,10,15,20,25,30这样划段。因为极性比较大也不敢上正相。
但是做了两个月，都是反相分分到最后，得不到单点，得到的都是一堆重合的样品。用凝胶100%甲醇洗脱，TLC上看起来一个点，一合并也是一堆点，所以怎么也做不出来。请各位指点一下吧~

我也在做正丁醇层，7:1~5:1左右，我的经验是硅胶不可不过，但是尽量少过，而且一次过好。从提药开始，大孔洗脱-硅胶减压住粗砍---合并后再粗砍到一个较大的斑点（每份40g左右）---大ODS粗砍，拌样上样，砍成5~8份，不合瓶，每个梯度一个馏分，8L一个馏分，每个馏分约5~10g，可以保证不交叉---利用分析液相寻找好做的馏分，一般梯度洗脱峰能基线分离的馏分---跑一根较好的硅胶，利用分析液相检测后合瓶，因为这时候很多硅胶板差不多的点其实在分析液相上都不一样的---最后制备和半制备结合，一个ODS下来的馏分如果比较好的话能得到20个以上的化合物

不行就制备薄层吧，这个搞好了效果还是相当不错的~比制备和反相都要有效率


我做的是二萜，基本上没有紫外，所以制备薄层也不好用啊。


没有紫外跟不能薄层制备之间好像没有关系吧？


留出两边的空间来显色，我实验室一个师兄的东西也是无荧光，然后这么搞的。


我们实验室没试过薄层制备 所以老板也不放心随便做 怕损失大

凝胶洗脱柱子不够长分离效果不太好 Rf值相近的点可以上一下MCI

凝胶的速度调到15秒一滴柱子要尽量长 最好接近两米


我们实验室的凝胶很长，MCI没有小柱子呢

试一下液相吧，正向色谱可能不行，可能会损失很多样品