各位老师大家好！我们在做一个原料药（盐酸盐）研究的时候，样品溶于水，采用液相色谱法测定含量，流动相为甲醇-盐溶液。我的样品溶液采用水、0.1mol/L盐酸和流动相分别配制相同浓度的溶液，三个样品在液相中检测的峰面积相差较大，水配制的溶液所得峰面积较小（峰面积/样品称量：20000）、0.1mol/L盐酸配制的溶液峰面积次之（峰面积/样品称量：23000）、和流动相配制的溶液峰面积最大（峰面积/样品称量：24000）。请问各位帮忙分析分析：是不同的溶剂配制的样品在液相中的吸收不一样吗？还是样品在不同的溶剂中溶解度不同，在水中没有完全溶解，造成峰面积小？请各位帮忙分析分析!谢谢！




不同溶剂，使极性有偏差，紫外吸收差异。所以，在液相中最好用流动相来配制。或者对照品及样品同用一个溶剂。个人观点，仅供参考。




我也遇到过类似的情况，就是同一个物质，相同的量，用不同的流动相跑，峰面积不一样！




支持楼上的




首先应该确定一下在这几种溶剂下的溶解度，另外在不同溶剂中样品容易出现最大吸收蓝移红移现象，也就是说在同一波长下容易出现吸收系数变化，虽然此种现象在紫外法上影响较大，另外不同溶剂有可能会影响峰型，造成峰面积差异，所以在没有溶解度问题的情况下，含量测定时，对照配制方法与样品配制方法一致即可




本品水溶性好。在同一流动相下，不同的溶剂配制的样品溶液在液相中的吸收是否一样？




可以参考

高效液相色谱的溶剂效应

http://analysis.dxy.cn/bbs/topic/14291234?tpg=32