我用ODH手性柱分离一个产品的RS结构，采用的是正己烷：异丙醇：二乙胺=950：50：1，配置的流动相超声了30min,就这样用封口膜封好后放在仪器上，第一天两峰的保留时间依次为12 ，14min,分离度1.58；第二天保留时间未13， 15min，分离度为1.9，第三天保留时间达到15 18min,分离度达到3了，不知道其原因是什么。开头我以为是正己烷挥发的多导致的，后来我稍微调整流动相比例，正己烷量增加，保留时间增加，峰变宽，分离度变小；异丙醇增加保留时间缩短但是峰变窄分离度增加。我想导致流动相放置时间长分离度反而好的原因可能是空气中的水分其的作用，不知道大家有什么看法。[img][/img]




这个应该是流动相没有混合均匀造成的，另外还可能与室温变化有关系。




谢谢楼上的，我是摇匀后超声流动相的，我们有柱温相，这个不会影响的，明天看不要三乙胺会怎么样




一般异构体时流速0.5ml/min，不要配1000ml的流动相肯定好多天使用不完，很容易出现你的情况。
相对的正己烷与二乙胺更易挥发，不一定是单纯的一种造成的，你没有必要验证具体是那一个的问题，建议重新配制一比即知。如果新配置的也如此，可能是柱子的原因。




楼主好啊，我这边正好也在用大赛璐手性柱，流动相和你的一模一样，用的正己烷最开始是96%的HPLC级别的，但是干扰很大，后来改用99%的HPLC级别的正己烷后，效果好点了，可以进行分析。不知道你的基线如何啊？这个和正己烷的这部分杂质有关系的吗？




还行，我们都用到进口的色谱级