请教各位老师:
我现在按照2010版药典方法测定三七皂苷中的五个成分,(流动相是:乙腈水, 走梯度,时间70分钟(前20分钟走等度)。检测波长203nm,机器是waters600,手动进样。)现在出现以下问题:
每天前2.3针有时候重复得非常好,到后面就彻底乱了,而且只是前三个峰保留时间(等度的时候)经常会相差很大(有时候几分钟),但后面两个峰基本能重合啊,神马原因啊,到底神马原因?
1.流动相:流动相为乙腈水,比例应该不会变化。
2.温度:感觉温度变化不大,而且保留时间变化没有规律性,应该不是温度影响。
3.柱子:换不同柱子都存在同样问题。
4.比例阀,单向阀:如果是比例阀问题那应该都重不起来啊,为什么前2.3针重复得非常好
5.机器脏了?
请各位老师不吝赐教 。
另外请教一个检测限和定量限的问题:
像这种多个成分的,检测限必须每个做呢还是只做含量最小的就可以了?
另外基线噪音应该怎么选取(走梯度基线很飘啊):1.选取峰左右一分钟?2.选平滑的一段?3需要进空白吗?
梯度走完后应让其在初始的比例下多平衡一段时间;
对于检测限问题:因为每个药物的仪器响应不同,应每个物质都做。
基线噪音选取与该峰相邻的一小段进行比较,
需要进空白。
清洗检测池和色谱柱
多平衡柱子,检测限和定量限都要做啊,
基线很飘,空白也飘么
谢谢两位老师的指教,空白也漂啊。平衡时间应该是够了啊,都是一样的动作,就只有其中一两针重合非常好。考察柱温20、25、30 情况有些类似,前面三个峰重不起来,后面的重得起来,但观察柱温只是左右波动一度啊,应该影响没那么大,而且也没再好的控制方法了。检测池刚洗过没多久,观察检测器,工程师说应该不是太脏。
我现在按照2010版药典方法测定三七皂苷中的五个成分,(流动相是:乙腈水, 走梯度,时间70分钟(前20分钟走等度)。检测波长203nm,机器是waters600,手动进样。)现在出现以下问题:
每天前2.3针有时候重复得非常好,到后面就彻底乱了,而且只是前三个峰保留时间(等度的时候)经常会相差很大(有时候几分钟),但后面两个峰基本能重合啊,神马原因啊,到底神马原因?
1.流动相:流动相为乙腈水,比例应该不会变化。
2.温度:感觉温度变化不大,而且保留时间变化没有规律性,应该不是温度影响。
3.柱子:换不同柱子都存在同样问题。
4.比例阀,单向阀:如果是比例阀问题那应该都重不起来啊,为什么前2.3针重复得非常好
5.机器脏了?
请各位老师不吝赐教 。
另外请教一个检测限和定量限的问题:
像这种多个成分的,检测限必须每个做呢还是只做含量最小的就可以了?
另外基线噪音应该怎么选取(走梯度基线很飘啊):1.选取峰左右一分钟?2.选平滑的一段?3需要进空白吗?
梯度走完后应让其在初始的比例下多平衡一段时间;
对于检测限问题:因为每个药物的仪器响应不同,应每个物质都做。
基线噪音选取与该峰相邻的一小段进行比较,
需要进空白。
清洗检测池和色谱柱
多平衡柱子,检测限和定量限都要做啊,
基线很飘,空白也飘么
谢谢两位老师的指教,空白也漂啊。平衡时间应该是够了啊,都是一样的动作,就只有其中一两针重合非常好。考察柱温20、25、30 情况有些类似,前面三个峰重不起来,后面的重得起来,但观察柱温只是左右波动一度啊,应该影响没那么大,而且也没再好的控制方法了。检测池刚洗过没多久,观察检测器,工程师说应该不是太脏。