最近用电化学检测器测神经递质，流动相中有水相（EDTA KH2PO4 离子对试剂B8）还有甲醇和乙腈，测去甲肾上腺素，多巴，5-羟色胺，遇到的问题是每次进样都会出现前几个样品峰面积不稳定，总是忽高忽低，要重复进样几次后才会稳定。想问一下各位高手是否遇到过这样的情况，该如何解决。
ECD对检测条件要求比较苛刻，首先应该恒温，另外仪器环境也应尽可能的稳定。还有使用离子对试剂时，流动相的平衡时间应该长一些（比如1h）。试试看。
电化学检测器:是库伦型还是安培型？或者库伦阵列？
我怀疑是你的电压选的不够好，或者是电极应该清洁了。
是安培型，我们做高香草酸就没有上述问题。做多巴胺时问题最严重。怀疑是多巴胺因为氧化而造成测定时的偏差，就是还找不到验证的方法。因为好像单胺类神经递质都比较容易氧化成醌类化合物。但还是无法解释为什么峰面积忽大忽小的问题，要是氧化了峰面积应该有一个变小的趋势才对，不应该像现在这样变来变去的。
我认为是多巴胺本身氧化的问题，多巴胺本身的氧化峰在电化学工作站上就出峰不稳定，所以工作电极非常重要，玻碳电极比较好！
多巴出峰不稳定是什么原因呢？我们加了一些抗氧化剂，焦亚硫酸钠。还是出现同样的问题。峰面积不稳定且过了两天再测，峰面积还是明显减小了，大约减少了1/4。和不加抗氧剂的比没有明显的改善。
如果解决了仪器环境温度尽量恒定,使用电源恒压的问题后,就只有以下3个问题:
1.流动相最好现用现配;或配4L,然后4度冰箱保存(效果很好,不过,溶剂瓶有气泡).流动相有离子对更应该注意,同时,最好避光.
2.泵内有气泡,好好purge一把,用100ML流动相.
3.换好的柱子,加保护柱.
至于多巴胺氧化问题,如果是透析液,可直接进样,或-80度保存;如果组织提取液,一般都用0.1M高氯酸提取,都已经氧化保护了,可直接进样或存-80度冰箱.不过,等待进样样品最好放在冰盒(圆形的那种,带盖儿的)里面.
还有,测5-10个样本,最好进一次标准品,进行校准!
P.S.单胺类可以一次 9种物质+1种内参照 15分钟之内完成,没必要又是DA,又是HVA的,多麻烦呀!
呵呵,好东西都给你们了.祝你们成功!
你好，我测儿茶酚胺是也遇到了这样的问题，连续进同一个进样瓶中的样品两次，两次峰面积会相差很大，用内标校正后虽然浓度是差不多了，但是这会严重影响我低浓度样品的检测，信号低的时候低浓度的就检测不到了。
哎，我最近也坐这个，用标准品做的峰面积差别都很大的
还不知道咋回事呢
ECD对检测条件要求比较苛刻，首先应该恒温，另外仪器环境也应尽可能的稳定。还有使用离子对试剂时，流动相的平衡时间应该长一些（比如1h）。试试看。
电化学检测器:是库伦型还是安培型？或者库伦阵列？
我怀疑是你的电压选的不够好，或者是电极应该清洁了。
是安培型，我们做高香草酸就没有上述问题。做多巴胺时问题最严重。怀疑是多巴胺因为氧化而造成测定时的偏差，就是还找不到验证的方法。因为好像单胺类神经递质都比较容易氧化成醌类化合物。但还是无法解释为什么峰面积忽大忽小的问题，要是氧化了峰面积应该有一个变小的趋势才对，不应该像现在这样变来变去的。
我认为是多巴胺本身氧化的问题，多巴胺本身的氧化峰在电化学工作站上就出峰不稳定，所以工作电极非常重要，玻碳电极比较好！
多巴出峰不稳定是什么原因呢？我们加了一些抗氧化剂，焦亚硫酸钠。还是出现同样的问题。峰面积不稳定且过了两天再测，峰面积还是明显减小了，大约减少了1/4。和不加抗氧剂的比没有明显的改善。
如果解决了仪器环境温度尽量恒定,使用电源恒压的问题后,就只有以下3个问题:
1.流动相最好现用现配;或配4L,然后4度冰箱保存(效果很好,不过,溶剂瓶有气泡).流动相有离子对更应该注意,同时,最好避光.
2.泵内有气泡,好好purge一把,用100ML流动相.
3.换好的柱子,加保护柱.
至于多巴胺氧化问题,如果是透析液,可直接进样,或-80度保存;如果组织提取液,一般都用0.1M高氯酸提取,都已经氧化保护了,可直接进样或存-80度冰箱.不过,等待进样样品最好放在冰盒(圆形的那种,带盖儿的)里面.
还有,测5-10个样本,最好进一次标准品,进行校准!
P.S.单胺类可以一次 9种物质+1种内参照 15分钟之内完成,没必要又是DA,又是HVA的,多麻烦呀!
呵呵,好东西都给你们了.祝你们成功!
你好，我测儿茶酚胺是也遇到了这样的问题，连续进同一个进样瓶中的样品两次，两次峰面积会相差很大，用内标校正后虽然浓度是差不多了，但是这会严重影响我低浓度样品的检测，信号低的时候低浓度的就检测不到了。
哎，我最近也坐这个，用标准品做的峰面积差别都很大的
还不知道咋回事呢