紫外可见分光光度计在测定吸光度是0.4时测量误差最小，一般测量A值要保持在0.2-0.8之间，超出这个范围测量误差较大，而HPLC一般用的都是紫外检测器吧，为什么没有听说对测量的药品有这方面的限制的？
我在做一个药物的溶出度测定，前三个点的吸光度的值都在0.2以下，这样的话可信度是不是不高，如果改用HPLC测的话，准确度和可信度就高了么？
请指教。
是的。因为紫外分光光度计本身都存在较大的检测误差。我曾经试过。同一个样扫描几次得出的吸光度都不一样。所以对于需要准确定量但是溶液稳定性好的样品最好改用HPLC。
HPLC测量有限制的，一般要做方法学验证，通俗一点说是做对照品曲线。如果供试品测量浓度在线性之内，就可放心测量。
我只是不明白为什么用紫外测得A值在0.2以下，然后用带紫外检测器的HPLC测定的话准确性会提高，是因为被分析的药品在经过柱子的时候被浓缩了的原因么？
对于HPLC来讲，做含量对于浓度也是有要求的，峰太低太高重现性也是会有影响。紫外分光法在空白无干扰情况下，定量也是没有问题的。HPLC多了色谱柱的分离，方法专属性方面比紫外要更好些。
用HPLC测定的准确度当然比一般没有经过分离的样品高。那是因为HPLC有选择性，专属性。分析一个样品，最重要的就是样品的专属性。您用光谱来测试样品，一般类似的物质都会有吸收，所以自然准确度差。对于光谱及HPLC检测器，原理都是一样。但是我们用光谱测A 的时候，那是吸收光后的读数, absorbance， 所以有0.2 到0.8的说法。一般如果测量A，到了0.8 就会达到饱和，就是不再增加读数。但是HPLC 检测器不同。因为我们读到的是电子积分信号。电子积分信号和我们常说的比尔定律，没有关系，所以线性可以一直无限的延长，一直到积分器达到饱和，也就是20伏特。也相当于 A＝2。因此，如果照这个说法，是违反比尔定律的。当初我做HPLC时，没有积分器，只有纸张的纪录器，因此必须用A 来做单位。其实您说的 A在0.2以下不准，也未必，因为那个时候，我们最高的范围往往就定在0.2 左右。完全看您仪器是如何使用。扯远了，不过，很高兴知道您能注意到这个问题。无论做啥，总要把基本原理搞懂，不是人家说啥，我们就全信，总要思考，进一步的了解，再做出判断。
我在做一个药物的溶出度测定，前三个点的吸光度的值都在0.2以下，这样的话可信度是不是不高，如果改用HPLC测的话，准确度和可信度就高了么？
请指教。
是的。因为紫外分光光度计本身都存在较大的检测误差。我曾经试过。同一个样扫描几次得出的吸光度都不一样。所以对于需要准确定量但是溶液稳定性好的样品最好改用HPLC。
HPLC测量有限制的，一般要做方法学验证，通俗一点说是做对照品曲线。如果供试品测量浓度在线性之内，就可放心测量。
我只是不明白为什么用紫外测得A值在0.2以下，然后用带紫外检测器的HPLC测定的话准确性会提高，是因为被分析的药品在经过柱子的时候被浓缩了的原因么？
对于HPLC来讲，做含量对于浓度也是有要求的，峰太低太高重现性也是会有影响。紫外分光法在空白无干扰情况下，定量也是没有问题的。HPLC多了色谱柱的分离，方法专属性方面比紫外要更好些。
用HPLC测定的准确度当然比一般没有经过分离的样品高。那是因为HPLC有选择性，专属性。分析一个样品，最重要的就是样品的专属性。您用光谱来测试样品，一般类似的物质都会有吸收，所以自然准确度差。对于光谱及HPLC检测器，原理都是一样。但是我们用光谱测A 的时候，那是吸收光后的读数, absorbance， 所以有0.2 到0.8的说法。一般如果测量A，到了0.8 就会达到饱和，就是不再增加读数。但是HPLC 检测器不同。因为我们读到的是电子积分信号。电子积分信号和我们常说的比尔定律，没有关系，所以线性可以一直无限的延长，一直到积分器达到饱和，也就是20伏特。也相当于 A＝2。因此，如果照这个说法，是违反比尔定律的。当初我做HPLC时，没有积分器，只有纸张的纪录器，因此必须用A 来做单位。其实您说的 A在0.2以下不准，也未必，因为那个时候，我们最高的范围往往就定在0.2 左右。完全看您仪器是如何使用。扯远了，不过，很高兴知道您能注意到这个问题。无论做啥，总要把基本原理搞懂，不是人家说啥，我们就全信，总要思考，进一步的了解，再做出判断。