用不同的柱子检测同一物质的含量，结果保留时间相差很大，是因为柱子的原因么？




用不同的色谱柱，保留时间有误差是正常的，因为不同色谱柱的填料、粒径、填充方法等的不同，都会使色谱柱对物质的洗脱能力存在差异。另外，还要考虑系统（气泡、堵塞等），流动相（溶剂挥发、配制误差）等的影响。





那在做稳定性试验的时候会不会有影响？




理论上重复进同一物质保留时间变化是不大的，你考虑下是不是溶解液和流动相差异的问题。




三根柱子变动都很大，说明该方法耐用性不好。你可以选择合适的柱子，以后就固定用它进行分析，验证写入SOP即可。




不同的柱子做同一样品，就和阳艳说的一样，柱子的填料、粒径、填充方法都不同导致保留时间不同，就是同一根柱子反复进同一物质，保留时间也会有所变化，只是有规律的拖后或者迁移而已。




不同柱子，里面的结构不同，所以保留时间不同是必然的现象。但是同一根柱子，保留时间，一旦柱子平衡后，就应该保持不变。我用过一根柱子，用了4年，上万针的进样，保留时间仍然不变（少于5％）。如果同样一个柱子，保留时间发生巨大的变化，那是有绝对大的问题。在系统检查上是过不了关的。所以，我们做色谱的时候，最重要的就是要求重复性，重复性是要在柱子达到平衡以后所表现的。一般新的柱子，应该在半小时之内达到平衡。就是冲洗柱子也不是长时间的冲洗。想想一根柱子到底有多长，相对的死体积有多少。用10个死体积冲洗就足够了。如果还不还原，那就是柱子出了大问题。以后再慢慢讨论柱子的问题。




前辈，如果大家都象你这样爱护柱子，估计卖柱子的要哭了。开个玩笑。