柱子是依利特Hypersil ODS柱 25um 4.6*250mm
流动相是乙腈：乙酸乙酯：0.1%磷酸，其中乙酸乙酯占到15%
因为我做的样品极性中等，不溶于正己烷、甲醇，易溶于丙酮、氯仿、乙酸乙酯；流动相中没有乙酸乙酯或氯仿这些溶剂就不能从柱上洗脱出来。




因为老师们都认为这流动相会损坏柱子，我去网上查了下说对于涂覆型的固定相，DMF、DMSO、二氧六环、甲苯、四氢呋喃、氯仿、二氯甲烷、丙酮、乙酸乙酯, 绝对不能用作流动相，它们会不可逆的破坏柱子。但是现在键合相色谱柱已成为主流。。难道键合上去的C18会被乙酸乙酯洗脱下来吗？望各位老师帮忙解释下 谢谢！




这些溶剂会破坏固定相的键合键。可以换用硅胶柱子用正相体系分析。
因为我做的样品极性中等，不溶于正己烷、甲醇，易溶于丙酮、氯仿、乙酸乙酯；流动相中没有乙酸乙酯或氯仿这些溶剂就不能从柱上洗脱出来。 其实洗脱跟溶解性没有必然联系。你可以换乙腈、DMSO、THF试试。丙酮水溶性很好，也可以尝试下。





就是,多试一试！！




好的 谢谢上面两位的建议！我会尝试下看看的~




不能追求新、奇、特
应根据品种合理选择，在实验前，应做充分调研，有的放矢




嗯 好的！多谢版主教诲~因为原先查看文献中的流动相中有氯仿 我替换成乙酸乙酯但是在流动相中比例加大了结果引起老师忌讳了。话说有老师建议我使用正相柱，我也想试试看呢。实在对不同柱子流动相要求有哪些不是很清楚阿




按你描述，使用正相应该比较合适
在我们不清楚的情况下，我们首先做的是模仿！不是想当然哈




哦哦！因为我用乙酸乙酯流动相的话也要30分钟左右出峰，如改醋酸会25分钟左右出峰。相对而言极性是蛮小的。。请问如果用正相柱，这个流动相能直接用吗？还是要替换下。据我导师说正相柱很快就出峰了结果就没让我尝试。。。其实我坚信应该也可以做，通过调节流速改组分也能出好峰的~




还要看是什么物质了
如果不清楚，一般是按照其溶解性，选择正相还是反相，气相还是液相




嗯 我查过沸点680气相是做不了的 不过导师让我看毛细管电泳文献 应该能行。