我最近在做β-谷甾醇的含量测定,在文献上查到用HPLC,紫外检测波长在205-210nm有强的吸收,但是我做了预实验发现,在该波长下,信号太弱,所以用紫外检测器检测不行。
由于我在这方面了解的不多，请问紫外检测能做出其含量测定吗？
谢谢各位老师给予指点！祝大家新年快乐！




你可以试试用ELSD，即蒸发光散射监测器。你的样品紫外信号太弱，ELSD正能弥补这一不足。所谓ELSD（Evaporative Light Scattering Detector）是柱洗脱液进行喷雾，流动相溶剂蒸发，留下的不挥发成分用光照射，检测它的散射光的检测器。也就是说，与流动相在一起但未蒸发的物质基本上都可检测，因此称为“Universal Deteetor”。建议你可以试试。




有意义吗？




采用末端吸收还是有的,就是可能要求仪器比较高,象中药中人参,三七等都采用205nm进行测定.




样品溶液制备时，用溶剂甲醇不能溶解我们的粉末，检测的时候就很麻烦。所以我想请教各位前辈们，溶剂应该换成什么？谢谢各位了！！




水、酸碱、乙腈、乙醇、异丙醇、四氢呋喃、DMSO、DMF等或它们的混合溶液。