各位战友好！半年前买的YMC ODS-AQ的色谱柱，一直用着理论塔板数都在7000以上，最近一星期用，降到5000，主峰变宽，柱压反而降了15bar左右，有可能是柱头塌陷或柱床移动，咨询工程师，回答是进样次数多了柱效就下降了，建议反向小流速甲醇冲洗，不知哪位站友遇到过类似情况，该怎么处理
将柱子反向小流速冲洗，出现规律性的大峰（排出气泡的原因）
反冲不要接检测器，很容易污染的。
柱子如果塌陷，柱压应该上升，所以这个行不通。用的次数多了，如果有强物质吸附在硅胶表面，自然就改变原来的好峰头了。聪明的您，应该知道怎么办了。
修理么？
拆开，柱头修复。
不复杂的。
首先谢谢您的打破砂锅问到底的精神。我觉得楼主应该谢谢您。我说过，如果是柱头堵塞了，柱子的反压力应该增加。如果硅胶塌陷了，也是同样的情形。如果压力没有明显的增加（假设仪器没有问题），那就是柱子内许多吸附的化合物，没有办法洗脱。YMC的柱子是不错的，所以沃特斯几年以前就已经收购了。那就想办法再生柱子。再生柱子并不一定能够还原，因为有时候，不可逆的binding, 用啥法也行不通。这个时候，可以试一试最后渠道，就是把柱子掉头。虽然柱子厂商一天到晚口口声声说他们的柱子可以两个方向，我是绝对不信的，除非到了不得已的时候。柱子公司希望您的柱子有一定生命，但不是无限生命。还有，早期我们很流行把柱子打开，换换frit, 目前早已不如此做了，为啥，因为您一打开，保证流失硅胶。而且都是5 微米的颗粒，要补充那是给自己找麻烦。如果还是10个微米，是可以试试的。不再多言。谢谢您。
丁老师，
国内穷，柱头修复很流行的。
专门有公司出售填料的。
很多人都是这方面的行家里手十几分钟完成也是不难的。。。。
（当然，手动修复出来的，临时效果不错；就是撑不了多久又得来，或许是因为手动的不如别人原装的紧密吧）
我刚开始做HPLC的时候，就是这样的。那时候是10个微米的柱子，我们把柱子打开，把那个小钢圈儿拿掉，换新的，然后用25微米的硅胶填充补满塌陷部分。结果还是不错的。为啥，因为那时候我们都用25厘米柱子，还有前柱子，就是柱子前一两个厘米塌了也无妨。到了现在，一般上谱的柱子都要600美元，不便宜，而且所有仪器配套设施包挂流动相，样品前的处理，都具备了，所以柱子堵了，是不应该发生的。现在柱子一般都是15厘米，还有更短的，而且都是5微米还有的更小，打开了，也未必能够把那个小玩意儿拿掉，填充补料，补5 微米的？还是10微米的粒子？这都是问题。国内的问题就出在，我们买的柱子是不是真能够帮我们解决问题。解决问题不是一时的。过去四年我用一根柱子，同样一个流动相，等梯度，前后进了上万针吧，还是好好的（略逊一点）。所以色谱的配套措施非常重要。谢谢您的回答。
现在穷单位还整什么研发？觉得连做QC都不行哈
有这点时间，应该干些重要的事情哈
光装沙子，到时候，石头往上搁？
比如，高校、研究所系列的NSF系列的……
1.楼主的问题，AQ的柱子，假如有机相多加那么一点点，柱压变化15bar，个人感觉也不是不可能。理论板数突然下降，说明柱内有物质干扰目标物质的吸附和解吸附，冲柱子是对的。
2.对于冲柱子，不知道您怎么冲的。（个人认为柱子即使有脏物在柱头，也应该先正着冲）如果已反冲的话，还可以75%乙腈+25%异丙醇（之前用乙腈过度）小流速反冲数小时
3.如果压力没有明显的增加（假设仪器没有问题），那就是柱子内许多吸附的化合物，没有办法洗脱
————请问这句话怎么理解呢？柱子内许多吸附的化合物和压力没有明显的增加，有什么关联吗？
4.关于换填料，确实是最后的办法。换过填料之后，可以接流动相冲几分钟，使填料填充更紧密，再继续添加填料，反复数次。照目前色谱柱的质量来看，宁可反着用，也不换填料
5.关于色谱柱的保养，第二天不用的话必须得好好冲一次。另外就是加预柱来保护色谱柱。
谢谢您的回答。之前另外一根柱子也反向用过，但过不了多久杂质就分不太好。我用低流速甲醇冲了两天，再正向用，柱效高了一点点，杂质分离度也有所改善，但用了两三天后，分离度就不行啦。
将柱子反向小流速冲洗，出现规律性的大峰（排出气泡的原因）
反冲不要接检测器，很容易污染的。
柱子如果塌陷，柱压应该上升，所以这个行不通。用的次数多了，如果有强物质吸附在硅胶表面，自然就改变原来的好峰头了。聪明的您，应该知道怎么办了。
修理么？
拆开，柱头修复。
不复杂的。
首先谢谢您的打破砂锅问到底的精神。我觉得楼主应该谢谢您。我说过，如果是柱头堵塞了，柱子的反压力应该增加。如果硅胶塌陷了，也是同样的情形。如果压力没有明显的增加（假设仪器没有问题），那就是柱子内许多吸附的化合物，没有办法洗脱。YMC的柱子是不错的，所以沃特斯几年以前就已经收购了。那就想办法再生柱子。再生柱子并不一定能够还原，因为有时候，不可逆的binding, 用啥法也行不通。这个时候，可以试一试最后渠道，就是把柱子掉头。虽然柱子厂商一天到晚口口声声说他们的柱子可以两个方向，我是绝对不信的，除非到了不得已的时候。柱子公司希望您的柱子有一定生命，但不是无限生命。还有，早期我们很流行把柱子打开，换换frit, 目前早已不如此做了，为啥，因为您一打开，保证流失硅胶。而且都是5 微米的颗粒，要补充那是给自己找麻烦。如果还是10个微米，是可以试试的。不再多言。谢谢您。
丁老师，
国内穷，柱头修复很流行的。
专门有公司出售填料的。
很多人都是这方面的行家里手十几分钟完成也是不难的。。。。
（当然，手动修复出来的，临时效果不错；就是撑不了多久又得来，或许是因为手动的不如别人原装的紧密吧）
我刚开始做HPLC的时候，就是这样的。那时候是10个微米的柱子，我们把柱子打开，把那个小钢圈儿拿掉，换新的，然后用25微米的硅胶填充补满塌陷部分。结果还是不错的。为啥，因为那时候我们都用25厘米柱子，还有前柱子，就是柱子前一两个厘米塌了也无妨。到了现在，一般上谱的柱子都要600美元，不便宜，而且所有仪器配套设施包挂流动相，样品前的处理，都具备了，所以柱子堵了，是不应该发生的。现在柱子一般都是15厘米，还有更短的，而且都是5微米还有的更小，打开了，也未必能够把那个小玩意儿拿掉，填充补料，补5 微米的？还是10微米的粒子？这都是问题。国内的问题就出在，我们买的柱子是不是真能够帮我们解决问题。解决问题不是一时的。过去四年我用一根柱子，同样一个流动相，等梯度，前后进了上万针吧，还是好好的（略逊一点）。所以色谱的配套措施非常重要。谢谢您的回答。
现在穷单位还整什么研发？觉得连做QC都不行哈
有这点时间，应该干些重要的事情哈
光装沙子，到时候，石头往上搁？
比如，高校、研究所系列的NSF系列的……
1.楼主的问题，AQ的柱子，假如有机相多加那么一点点，柱压变化15bar，个人感觉也不是不可能。理论板数突然下降，说明柱内有物质干扰目标物质的吸附和解吸附，冲柱子是对的。
2.对于冲柱子，不知道您怎么冲的。（个人认为柱子即使有脏物在柱头，也应该先正着冲）如果已反冲的话，还可以75%乙腈+25%异丙醇（之前用乙腈过度）小流速反冲数小时
3.如果压力没有明显的增加（假设仪器没有问题），那就是柱子内许多吸附的化合物，没有办法洗脱
————请问这句话怎么理解呢？柱子内许多吸附的化合物和压力没有明显的增加，有什么关联吗？
4.关于换填料，确实是最后的办法。换过填料之后，可以接流动相冲几分钟，使填料填充更紧密，再继续添加填料，反复数次。照目前色谱柱的质量来看，宁可反着用，也不换填料
5.关于色谱柱的保养，第二天不用的话必须得好好冲一次。另外就是加预柱来保护色谱柱。
谢谢您的回答。之前另外一根柱子也反向用过，但过不了多久杂质就分不太好。我用低流速甲醇冲了两天，再正向用，柱效高了一点点，杂质分离度也有所改善，但用了两三天后，分离度就不行啦。