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HPLC

时间: 2012-03-26 12:21:01 作者: 来源: 字号:
老板的课题,一种中药的提取物,经过预处理之后跑HPLC,两个主要的峰形是这样的[img]file:///C:\Documents and Settings\randongzhi\Application Data\Tencent\Users\625489903\QQ\WinTemp\RichOle\$EAJ02%9@}CF]KM79MXC[QT.jpg[/img],感觉上还是比较纯的,然后把分离得到的单体拿去打飞行质谱的时候有很多的杂峰,新手,现在感觉特别迷茫,求高手的指点。
版主111留言:
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没看到你图,但是问题大概是这样的:

1.肉眼毕竟是肉眼,如果什么都可以用眼睛解决,事情就好办了

2.浓度问题:低浓度上,杂质自然无法显现

3.杂质响应低:在某波长下,该杂质被低估了

4.HPLC与TOF差别还是蛮大的哦

5.其他问题




条件说的具体一点,你用的检测波长是多少nm?是否做过全波长扫描?可能你选择的波长下只能看到主成分而看不到杂质。建议用DAD检测器进行全波长扫描。




这是跑色谱的一个图,条件是紫外检测254和280两个波长。谢谢版主和无名英雄看了你们的留言收到的启发不少:如果是浓度的问题的话,低浓度下杂质的浓度也应该是小的才对的呀,会不会是版主说的杂质在测定波长下的响应值低以至于被忽略到了。前段时间老板重新又拿了一批同样的样品做高效,里面的峰形我感觉完全不是这么一回事,杂质峰多了很多而且响应值基本上都挺高,两个主峰的位置也不一样了完全搞不懂(不好意思这是第二个图,原图没有找到,自己花了一个,有点丑但是整体效果就是这样);无名英雄说的全波长扫描真没有做过,嗯,我觉得很可行。谢谢各位了,谢谢




还有作LC-TOF-MS的时候,不同化合物的离子化程度不一样,所以在紫外上响应高的峰在MS上响应不一定高,反之亦然.




借助楼主和大家探讨HPLC的机会, 我想请教一下,在做HPLC前的样品处理问题。血液采集,分离,及分离后需要装入什么样的试管中,血细胞和血清的试管中是否需要加入抗凝剂等物质?在什么样条件下存储?多多打扰,希望大家给些指点。




需要,一般零下20度保存。




最好装在子弹头中 取样跑柱时方便 并且保存在冷冻条件
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