我最近要做一个多肽的水解，然后测定氨基酸。查看文献发现水解条件是6mol/L盐酸110℃水解24h，可是这个条件怎么达到呢，可不可以放在烘箱里或高压灭菌锅中，具体怎么操作呢。有文献说水解需要在氮气环境中，那么什么时候需要氮气环境什么时候又不需要氮气环境呢，望大家多提意见。




蛋白水解的方式很多，也可以参考下别的做法。110度可以用油浴满足。这个体系需要密闭，充氮可以保护氨基酸。




我以前的做法，是把样品放在很小的玻璃管子里，加酸后，放在一个密闭的玻璃瓶中，然后放入烤箱。玻璃瓶一定要禁封，不能漏气。有的氨基酸不稳定，所以必须在氮气下进行。




我们公司氨基酸比值做得很多，所以我们专门买了一个金属浴，磨具定制，刚好放下2ml西林瓶，如果做得多，买一个有必要，不贵2000多吧。实在不行，西林瓶轧盖，鼓风干燥器110℃，搞定，就是有点安全隐患，其它没啥。
氮气环境不是必须，常见氨基酸中cys和met容易氧化，它们在碱性条件易氧化，酸性条件很难氧化。如果是含有这两个氨基酸的，还是氮气保护比较稳妥，另外加酚也是保护的不错选择。
关键是怕样品污染，结果对Gly和Ser影响很大。