最近研究一种植物，其中含有黄酮苷及苷元，如：芦丁、槲皮素、木犀草苷、木犀草素、山奈酚等，我想同时测定木犀草素和槲皮素及山奈酚的含量，查阅了几篇文献，均采用酸水解的方法处理样品，现在的问题是水解之后，苷转化为了苷元，芦丁转化为槲皮素，木犀草苷转化为木犀草素，这样测定有意义么？
肯定没有意义了！
只要在进入柱子之前，或出了柱子之后，进行任何化学反应，以期取得信号都是可以的。因为柱子本身是只管分离的作用，是物理作用，就是说在柱子之内是不能发生任何化学反应。这是基本原理。您看我们做氨基酸，不是柱前反应就是柱后反应，取得灵敏度以便看到信号。但是您在做这些实验的时候，您的标准品也一样要进行水解反应，还要测回收率。最重要的是您要确认水解作用完成，不然您就没有重复性了呀。最好是用自动方法来完成化学反应，然后进样。这样化学反应的时间一致，就是化学反应不完成也没有啥大关系。希望您能了解我的说法。不懂，就再问。
感谢caojian2006 和ccyting的回答，caojian2006同志的回答我不太认可，因为我看了好几篇文献，过程中均采用了酸水解的方法处理样品，ccyting老师的回答我确实有点理解不过来，应该是认为这样做有一定意义。我是准备做这个植物的含量测定的标准，估计这样做不行。
刚开了2篇文献：
1.《HPLC法测定红花地上部分中木犀草苷和木犀草素的含量》中样品处理采用盐酸甲醇超声提取30分钟，然后滤液90℃回流30分钟；
2.《HPLC 法测定金银花中常春藤皂苷元、齐墩果酸、槲皮素、木犀草苷和绿原酸》样品处理同样也利用了硫酸水解加热提取的方法；
把我弄得有点糊涂了？？？
ccyting老师是高屋建瓴啊，一句话就说到色谱的最基本的东西，柱子就是用来分离，不改变任何物质，物理作用啊！至于分离前做什么，分离后怎么检测，都和柱子没关系的！你只要让你想分开的东西在柱子里分开就行了。回到你的初衷，你想检测草药中的成分，直接检测什么苷的不行，就是柱子没法直接给你分开，要么就找到能把它们直接分开的柱子，要么就把它变成柱子能分开的东西（进柱子前处理），那就是化学变化了。然后就是另一个基本问题：如何定量？“但是您在做这些实验的时候，您的标准品也一样要进行水解反应，还要测回收率。”这不就是有标准了嘛，那就相对的定量了啊。ccyting老师还有很多关于标准品的心得，好好琢磨一下。ccyting老师的思维已入化境，百炼钢化作绕指柔，佩服啊！再随便说说，研究思维的训练最重要，越做事情越觉得思维重要啊。我是一色谱外行，随便说说啦。
肯定没有意义了！
只要在进入柱子之前，或出了柱子之后，进行任何化学反应，以期取得信号都是可以的。因为柱子本身是只管分离的作用，是物理作用，就是说在柱子之内是不能发生任何化学反应。这是基本原理。您看我们做氨基酸，不是柱前反应就是柱后反应，取得灵敏度以便看到信号。但是您在做这些实验的时候，您的标准品也一样要进行水解反应，还要测回收率。最重要的是您要确认水解作用完成，不然您就没有重复性了呀。最好是用自动方法来完成化学反应，然后进样。这样化学反应的时间一致，就是化学反应不完成也没有啥大关系。希望您能了解我的说法。不懂，就再问。
感谢caojian2006 和ccyting的回答，caojian2006同志的回答我不太认可，因为我看了好几篇文献，过程中均采用了酸水解的方法处理样品，ccyting老师的回答我确实有点理解不过来，应该是认为这样做有一定意义。我是准备做这个植物的含量测定的标准，估计这样做不行。
刚开了2篇文献：
1.《HPLC法测定红花地上部分中木犀草苷和木犀草素的含量》中样品处理采用盐酸甲醇超声提取30分钟，然后滤液90℃回流30分钟；
2.《HPLC 法测定金银花中常春藤皂苷元、齐墩果酸、槲皮素、木犀草苷和绿原酸》样品处理同样也利用了硫酸水解加热提取的方法；
把我弄得有点糊涂了？？？
ccyting老师是高屋建瓴啊，一句话就说到色谱的最基本的东西，柱子就是用来分离，不改变任何物质，物理作用啊！至于分离前做什么，分离后怎么检测，都和柱子没关系的！你只要让你想分开的东西在柱子里分开就行了。回到你的初衷，你想检测草药中的成分，直接检测什么苷的不行，就是柱子没法直接给你分开，要么就找到能把它们直接分开的柱子，要么就把它变成柱子能分开的东西（进柱子前处理），那就是化学变化了。然后就是另一个基本问题：如何定量？“但是您在做这些实验的时候，您的标准品也一样要进行水解反应，还要测回收率。”这不就是有标准了嘛，那就相对的定量了啊。ccyting老师还有很多关于标准品的心得，好好琢磨一下。ccyting老师的思维已入化境，百炼钢化作绕指柔，佩服啊！再随便说说，研究思维的训练最重要，越做事情越觉得思维重要啊。我是一色谱外行，随便说说啦。