各位分离提取的前辈们,小妹在上柱子后得到一红色物质,此物质在甲醇中溶解度不大,所以就用甲醇除掉了一部分在甲醇中溶解度大的杂质。
然后在高效液相条件下,除溶剂峰外,只有两个峰,其中一个很高的峰,占总峰面积的95%以上,这个高峰就是我要的物质。
那个小峰面积很小,但是和那个高峰相距很近,保留时间相差2分钟。这样看来,在此液相条件下,此物质比较纯,但不敢确定是否含有无紫外吸收的杂质存在。
各位前辈,这样的条件,我可以直接送去打谱么?
或者怎样确定此化合物的纯度呢?
先各位前辈的不吝赐教。
各位前辈帮忙哈。
小妹明年就要毕业,接下来确定了此化合物之后,还需要作质量标准呢。
再次各位前辈的不吝赐教。
建议,你用GF254 TLC展层,紫外显色,硫酸显色,常用的显色剂。如果都是单点,就可以做核磁。估计还有其他物质。
楼上朋友的帮助。
诚恳期望其他朋友的建议。
换个液相条件试试,只要峰形正常,就可以确定主峰是产品。可以坐一个紫外扫描,看一看有无其他特征峰。根据 扫描情况,结合可能的杂质换个波长再测一下。
先确定物质在各种波长的吸收吧!
几点建议供你参考
1、不知道你液相的保留时间是多少?我认为使用分析液相验证纯度,最好保证样品在10各保留体积左右出峰,即20imn左右或以上。出峰过早,一些杂质峰可能分不开。另外,进样量不要太大,防止主峰过太包裹其他杂质样品。
2、你的检测波长是多少?一个波长检测的话,结果未必可靠。如果有条件,最好使用DAD检测器,一般可以同时检测190-400nm的吸收情况。如果条件不允许,至少要 多个波长检测一下。我觉得一般物质都会有较大末端吸收,所以一个波长要设在200nm左右,如果此时杂质干扰较小,样品纯度会比较好。
3、不知道你样品的峰形如何,如果峰形不好,如有肩峰、拖尾等情况,其中一种可能就是纯度不够好。
4、从你的描述看,我个人建议,如果样品量足够,你最好使用制备液相纯化一下,因为我估计溶剂峰中有可能会含有杂质(也可能是有用的物质)。你也可以把溶剂峰接下来点板看看。
5、如果可以,实际上以上步骤你都可以暂时略去,而最直接的办法就是做个氢谱看看纯度,如果纯度不好,再回收样品进行纯化。实际上核磁谱是很好的验证纯度的方法。当然如果你用DMSO测谱的话,回收样品会比较麻烦。
祝试验顺利
楼上各位朋友的帮助,小妹不胜感激。
尤其hope50朋友的帮助。
我的液相条件是一个做指纹图谱的条件,出峰时间比较晚,55分钟出峰,这个大峰就是我要的物质,峰形对称,很好。另外那个小峰57分钟多出峰。检测波长:440nm。现在就是使用的DAD检测器,看了一下,在别的时间段别的波长下基本没有峰出现。
这样的话问题应当不会太大,可以做谱看一看。当然下面的意见你也可以参考一下,不过可能不需要在验证了。
1、不知道你液相一共跑了多久,有没有可能60、70十分钟还有峰出现,你可以在缩短样品出峰时间试一试。
2、如果你没有使用反相(C18)开放柱进行分离,样品中有可能包含着反相液相中保留时间相差悬殊的杂质或有用的物质,也就是说有可能在溶剂峰或者保留时间更长的地方存在杂质。这也是为什么最好能正反相填料结合使用的原因。
得到纯的化合物别忘了告诉大家!
hope50朋友的帮助。
我总共跑了70分钟。最后十分钟是甲醇:乙腈9:1的比例,也就相当于冲柱子,基本没有峰出现。
你的ID也很好,希望,希望,恩,希望我可以得到一个好的化合物。
先做个溶点测定,扫一下紫外光谱,准备做个氢谱确定下纯度。
再次hope50朋友的帮助。
我觉得你应该先点板看看,换不同的显色剂,还可以在反相板上点一个试试。如果三次以上都很纯的话可以先送去做个氢谱看看,不行再拿回来纯化喽
还可以跑薄层,测溶点试试吧
打个氢谱吧也不贵,快
不用太麻烦
arenla的建议最可行,也最保险,当然如果有条件可以用DAD和蒸发光测一下,也是不错的
嗯,再次各位战友的帮助。
希望可以得到一个比较纯的化合物。
出锋时间可否通过调整流动相比例缩短?55分钟太长了,漫长的等待
物质肯定是不纯的,不过可以做1H-NMR看一下,如需要还可以打MS,以确定是不是你要的化合物.
然后在高效液相条件下,除溶剂峰外,只有两个峰,其中一个很高的峰,占总峰面积的95%以上,这个高峰就是我要的物质。
那个小峰面积很小,但是和那个高峰相距很近,保留时间相差2分钟。这样看来,在此液相条件下,此物质比较纯,但不敢确定是否含有无紫外吸收的杂质存在。
各位前辈,这样的条件,我可以直接送去打谱么?
或者怎样确定此化合物的纯度呢?
先各位前辈的不吝赐教。
各位前辈帮忙哈。
小妹明年就要毕业,接下来确定了此化合物之后,还需要作质量标准呢。
再次各位前辈的不吝赐教。
建议,你用GF254 TLC展层,紫外显色,硫酸显色,常用的显色剂。如果都是单点,就可以做核磁。估计还有其他物质。
楼上朋友的帮助。
诚恳期望其他朋友的建议。
换个液相条件试试,只要峰形正常,就可以确定主峰是产品。可以坐一个紫外扫描,看一看有无其他特征峰。根据 扫描情况,结合可能的杂质换个波长再测一下。
先确定物质在各种波长的吸收吧!
几点建议供你参考
1、不知道你液相的保留时间是多少?我认为使用分析液相验证纯度,最好保证样品在10各保留体积左右出峰,即20imn左右或以上。出峰过早,一些杂质峰可能分不开。另外,进样量不要太大,防止主峰过太包裹其他杂质样品。
2、你的检测波长是多少?一个波长检测的话,结果未必可靠。如果有条件,最好使用DAD检测器,一般可以同时检测190-400nm的吸收情况。如果条件不允许,至少要 多个波长检测一下。我觉得一般物质都会有较大末端吸收,所以一个波长要设在200nm左右,如果此时杂质干扰较小,样品纯度会比较好。
3、不知道你样品的峰形如何,如果峰形不好,如有肩峰、拖尾等情况,其中一种可能就是纯度不够好。
4、从你的描述看,我个人建议,如果样品量足够,你最好使用制备液相纯化一下,因为我估计溶剂峰中有可能会含有杂质(也可能是有用的物质)。你也可以把溶剂峰接下来点板看看。
5、如果可以,实际上以上步骤你都可以暂时略去,而最直接的办法就是做个氢谱看看纯度,如果纯度不好,再回收样品进行纯化。实际上核磁谱是很好的验证纯度的方法。当然如果你用DMSO测谱的话,回收样品会比较麻烦。
祝试验顺利
楼上各位朋友的帮助,小妹不胜感激。
尤其hope50朋友的帮助。
我的液相条件是一个做指纹图谱的条件,出峰时间比较晚,55分钟出峰,这个大峰就是我要的物质,峰形对称,很好。另外那个小峰57分钟多出峰。检测波长:440nm。现在就是使用的DAD检测器,看了一下,在别的时间段别的波长下基本没有峰出现。
这样的话问题应当不会太大,可以做谱看一看。当然下面的意见你也可以参考一下,不过可能不需要在验证了。
1、不知道你液相一共跑了多久,有没有可能60、70十分钟还有峰出现,你可以在缩短样品出峰时间试一试。
2、如果你没有使用反相(C18)开放柱进行分离,样品中有可能包含着反相液相中保留时间相差悬殊的杂质或有用的物质,也就是说有可能在溶剂峰或者保留时间更长的地方存在杂质。这也是为什么最好能正反相填料结合使用的原因。
得到纯的化合物别忘了告诉大家!
hope50朋友的帮助。
我总共跑了70分钟。最后十分钟是甲醇:乙腈9:1的比例,也就相当于冲柱子,基本没有峰出现。
你的ID也很好,希望,希望,恩,希望我可以得到一个好的化合物。
先做个溶点测定,扫一下紫外光谱,准备做个氢谱确定下纯度。
再次hope50朋友的帮助。
我觉得你应该先点板看看,换不同的显色剂,还可以在反相板上点一个试试。如果三次以上都很纯的话可以先送去做个氢谱看看,不行再拿回来纯化喽
还可以跑薄层,测溶点试试吧
打个氢谱吧也不贵,快
不用太麻烦
arenla的建议最可行,也最保险,当然如果有条件可以用DAD和蒸发光测一下,也是不错的
嗯,再次各位战友的帮助。
希望可以得到一个比较纯的化合物。
出锋时间可否通过调整流动相比例缩短?55分钟太长了,漫长的等待
物质肯定是不纯的,不过可以做1H-NMR看一下,如需要还可以打MS,以确定是不是你要的化合物.