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请教各位老师大侠们关于过大柱

时间: 2008-09-23 01:29:37 作者: 来源: 字号:
我做的植物提取萃取的乙酸乙酯部分有48克准备用45克过大柱子,请问各位大侠我用120克硅胶拌样,450克硅胶装柱,用氯仿甲醇洗脱,每个梯度3000毫升,300毫升接一个流分可以吗?请给出些建议万分感激!!!!!!!
伴样硅胶视你样品的溶解情况,溶的好就可以少加些,上柱时可以节省溶剂。装柱硅胶用伴样硅胶的1-2倍就可以,第一根大柱可以上的粗一点,梯度可以设得粗一点,反正下来后大多要合并起来。不知你的浸膏点板了没有,如果小极性化合物比较多,建议先用石油醚丙酮系统,砍到8:2左右换纯氯仿,再用氯仿甲醇系统。每个流份约两倍柱体积,冲几份视东西下来的情况,如果冲一份什么东西都没冲下来,色带也不走,就可以直接加大梯度,如果某一梯度东西多,可以多冲几份。
以上建议仅供参考,分离需要经验,需要在实验中不断积累,祝好运!
溶的好就可以少加些,上柱时可以节省溶剂。装柱硅胶用伴样硅胶的1-2倍就可以,第一根大柱可以上的粗一点,梯度可以设得粗一点,反正下来后大多要合并起来。不知你的浸膏点板了没有,如果小极性化合物比较多,建议先用石油醚丙酮系统,砍到8:2左右换纯氯仿,再用氯仿甲醇系统。每个流份约两倍柱体积,冲几份视东西下来的情况,

请问二楼的老师,怎样才算溶解的好啊?是要呈透明状吗?请问总共六个梯度可以吗。能不能具体的说一下梯度。你是说每个梯度洗脱液为两倍柱体积吗?
首先,我说的大柱是减压柱。
用各种溶剂,以最少的量溶解,如果有什么都不溶的渣滓,建议过滤出来。没有明显渣滓就算溶好,因为渣滓太多会使伴样不均匀。装柱的总体积最好不要超过柱子的三分之一,每个流分把柱子装满就可以。给你一个建议的梯度:纯石油醚,石油醚:丙酮99:1, 95:5, 20:1, 10:1, 9:1,8:2,纯氯仿,氯仿:甲醇99:1,95:5, 20:1, 10:1, 9:1,8:2,5:5,纯甲醇。最好你还是先点个板,看看你的化合物的极性分布。如果是常压柱也基本是一样的,梯度可以设的更粗一点。
很受启发
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