各位大侠好!
小弟最近在做脱氧尿苷的三磷酸化.
我采用的是磷酸三甲酯当溶剂，于氮气保护下，加入质子绵和三氯氧磷，在冰水浴中搅拌3小时。然后，加入三丁胺焦磷酸盐和三丁胺，搅拌10分钟后，再加入三乙胺的碳酸盐水溶液。之后是加入氨水脱三氟乙酸根（原料上带的）。
不知道以上操作正确否。另外，还请大家不吝告诉我一下其它的三磷酸化方法，不胜感激！
在分离提纯的时候是要求用DEAE-SEPHADEX A25离子交换柱的，以前从来没使用过，还请哪位使用过的站友教授一下。
另外，在用LC-MS确认分子量的时候，只在POSITIVE电离中出现了127，253和669；NEGATIVE电离里出现了125，251。大家能帮忙分析一下吗？！！

怎么没人阅览啊？
高人快来帮忙吧。