我在做生物碱的分离，目前正在摸索TLC条件，接下来要做的是用氧化铝柱进行分离，我以前没有装过柱子，查资料又很少有详细的说明，希望高手们帮帮忙吧！ 干法装柱，一次倒入，然后敦实，再干法上样。柱层析氧化铝一般是100-200目的，颗粒较粗，干法紧一些，不过流速也很快的。
那湿法装柱是否和硅胶湿柱一样的装法呢？
fuxiaopu,你好
氧化铝填料需要过筛吗？有具体要求多少目吗？
柱层析氧化铝一般要过100~150目筛，装柱前要处理。方法：加水煮沸数次，至水煮沸液pH在9~10为止（可用pH试纸检测）。过滤，把水吸干，常温干燥后180度活化3小时。
至于装柱方法和硅胶柱差不多。不过氧化铝载样量较硅胶大，分离同样量的样品要少用些载样料。
fuxiaopu,你好
氧化铝填料需要过筛吗？有具体要求多少目吗？
TO fuxiaopu ,你好啊
我现在薄层层析跑出四个斑点,后面两个斑点分开了,也没什么拖尾,前面两个斑点不是很清楚,即Rf较小的两个斑点,也有点拖尾,我的展开剂是氯仿:丙酮=1:1,我现在应该怎么调极性呢?
假如我的展开剂比例可以了,上柱的时候,梯度洗脱时,展开剂的极性比列应该怎么设呢?听说薄层层析与上柱的极性有比例放大的关系
TO wuyi2001cn，你好，你了
我还想问一下你所说的"不过氧化铝载样量较硅胶大，分离同样量的样品要少用些载样料"，样品与氧化铝有没有一定的比例，一般情况下是多少？
我看了样品：硅胶＝1：50－1：100，是否样品：氧化铝也在这个范围呢？
你氯仿:丙酮1:1跑的是氧化铝板还是硅胶板?Rf值都是多少?你是粗分吗?
如果是硅胶的话,并且点较少,那么使你要的点Rf值是0.2到0.3的这个展开剂就可以直接作为起始洗脱剂,(有些人说还要在此基础上适当放小极性,原因是为了保险或者是点本来离得比较近,但根据实践,如果你要的点Rf值在此0.2-0.3,点之间Rf相差0.1,就用这个展开剂洗脱是可行的,而且一定能分开).
如果是氧化铝板可能就要小心一些,起始溶剂的极性尽可能放小一些,比如可以拿纯氯仿做起始洗脱剂.
了
我跑薄层用的是中性氧化铝，所以柱层析准备用氧化铝，我后面又跑了一下薄层，发现有六个斑点，Rf值从0.16-0.86。我现在要进行粗分，还不知道要哪些点，所以有点茫然，不知道后面该怎么进行？我的目的就是要从我提取的总生物碱中分出至少3-5个单体，希望fuxiaopu大侠在指点迷津啊！
那就纯氯仿开始,然后氯仿:丙酮40:1,30:1,20:1,10:1,8:1,6:1,4:1等等,如果样品样量很大,梯度还可以少一些.
to fuxiaopu :你好，我想问一下，你设梯度极性是根据什么设的，为什么要那么设呢，能不能设为纯氯仿开始，氯仿:丙酮90:10,80:20,70:30,60:40,50：50
60:40,40:60，30：70，20：80，10：90，纯丙酮，我根据我设的梯度，跑刚开始就有黄色，但是不知道是不是生物碱，但是，从60:40,40:60，30：70，20：80，10：90就没有什么颜色了，我始终没有搞懂梯度的设定，所以希望你帮帮忙
你那样设梯度也是可以的。要是粗分也没必要设的那么细，梯度太多，花费的时间就长，一般粗分段一个60克以上的样品，两周时间是个极限，不能再多了。我设梯度是按照极性每次增加的倍数差不多来的。柱子冲到最后时，梯度可以变化的快些，比如可以从1：2的氯仿甲醇直接变到纯甲醇。
那200----300目的是干什么用的那？
中性氧化铝的ph是多少那？
我前几天用的中性氧化铝用水浸泡，水的PH是8点多/
我没用过氧化铝，望高手指点
那湿法装柱是否和硅胶湿柱一样的装法呢？
fuxiaopu,你好
氧化铝填料需要过筛吗？有具体要求多少目吗？
柱层析氧化铝一般要过100~150目筛，装柱前要处理。方法：加水煮沸数次，至水煮沸液pH在9~10为止（可用pH试纸检测）。过滤，把水吸干，常温干燥后180度活化3小时。
至于装柱方法和硅胶柱差不多。不过氧化铝载样量较硅胶大，分离同样量的样品要少用些载样料。
fuxiaopu,你好
氧化铝填料需要过筛吗？有具体要求多少目吗？
TO fuxiaopu ,你好啊
我现在薄层层析跑出四个斑点,后面两个斑点分开了,也没什么拖尾,前面两个斑点不是很清楚,即Rf较小的两个斑点,也有点拖尾,我的展开剂是氯仿:丙酮=1:1,我现在应该怎么调极性呢?
假如我的展开剂比例可以了,上柱的时候,梯度洗脱时,展开剂的极性比列应该怎么设呢?听说薄层层析与上柱的极性有比例放大的关系
TO wuyi2001cn，你好，你了
我还想问一下你所说的"不过氧化铝载样量较硅胶大，分离同样量的样品要少用些载样料"，样品与氧化铝有没有一定的比例，一般情况下是多少？
我看了样品：硅胶＝1：50－1：100，是否样品：氧化铝也在这个范围呢？
你氯仿:丙酮1:1跑的是氧化铝板还是硅胶板?Rf值都是多少?你是粗分吗?
如果是硅胶的话,并且点较少,那么使你要的点Rf值是0.2到0.3的这个展开剂就可以直接作为起始洗脱剂,(有些人说还要在此基础上适当放小极性,原因是为了保险或者是点本来离得比较近,但根据实践,如果你要的点Rf值在此0.2-0.3,点之间Rf相差0.1,就用这个展开剂洗脱是可行的,而且一定能分开).
如果是氧化铝板可能就要小心一些,起始溶剂的极性尽可能放小一些,比如可以拿纯氯仿做起始洗脱剂.
了
我跑薄层用的是中性氧化铝，所以柱层析准备用氧化铝，我后面又跑了一下薄层，发现有六个斑点，Rf值从0.16-0.86。我现在要进行粗分，还不知道要哪些点，所以有点茫然，不知道后面该怎么进行？我的目的就是要从我提取的总生物碱中分出至少3-5个单体，希望fuxiaopu大侠在指点迷津啊！
那就纯氯仿开始,然后氯仿:丙酮40:1,30:1,20:1,10:1,8:1,6:1,4:1等等,如果样品样量很大,梯度还可以少一些.
to fuxiaopu :你好，我想问一下，你设梯度极性是根据什么设的，为什么要那么设呢，能不能设为纯氯仿开始，氯仿:丙酮90:10,80:20,70:30,60:40,50：50
60:40,40:60，30：70，20：80，10：90，纯丙酮，我根据我设的梯度，跑刚开始就有黄色，但是不知道是不是生物碱，但是，从60:40,40:60，30：70，20：80，10：90就没有什么颜色了，我始终没有搞懂梯度的设定，所以希望你帮帮忙
你那样设梯度也是可以的。要是粗分也没必要设的那么细，梯度太多，花费的时间就长，一般粗分段一个60克以上的样品，两周时间是个极限，不能再多了。我设梯度是按照极性每次增加的倍数差不多来的。柱子冲到最后时，梯度可以变化的快些，比如可以从1：2的氯仿甲醇直接变到纯甲醇。
那200----300目的是干什么用的那？
中性氧化铝的ph是多少那？
我前几天用的中性氧化铝用水浸泡，水的PH是8点多/
我没用过氧化铝，望高手指点