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薄层检查为何如此不稳定

时间: 2008-09-23 00:57:07 作者: 来源: 字号:
我用TLC检测两个分离部位,同一天相继做的两块板,相同的样品,相同展开条件,可是居然两次的Rf值结果完全相反,请教高人指点是何原因,!
你的结果比较离奇。
一般TLC结果决定于支持介质和展开体系,当然也受温度、点样位置及方式、层析体系密封性等有关,但这些因素也只会使Rf值稍有改变,很难引起相反的结果。
我估计可能是你的展开体系是否含挥发性成份,第二次用时不是新配或存放时间过长,引起展开体系的变化所造成的。
还有,点样位置要适中,不能过低浸于展开剂中,也不宜太高,降低展开效率。
再试试吧。
GOOD LUCK!
fishbody 的建议,是够离奇的,呵呵。我的展开剂是氯仿和乙酸乙酯的混和体,层析的影响因素我有考虑过,所以每次都会换新溶剂(不过是配制好了在试剂瓶里的),做了有半个月了,结果总是不稳定,有时Rf值有明显的差距,有时有没什么区别,后来还居然相反了,我反复做,总是没重现性,又找不到合适的解释,唉,怎么办呢,痛苦ing!
展开剂要现配现用,配制后要充分混匀,静置不分层方可使用。
再努力吧!
做实验肯定痛苦时候多啦!大家都是痛苦ing!
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