我是新手，用到苯酚-硫酸法来测定多糖含量，遇到下面几个问题，请指教：
1.苯酚一定要重蒸馏吗？如果是新打开的可不可以不蒸馏啊？
2.如果重蒸，它沸点160，在水浴里减压蒸馏能蒸得出吗？我之前已经试过用减压旋蒸，可能是量少吧，都没有到接收瓶中，最多只在接头那里，后来怕它冷却后凝在不容易洗下来的地方就不敢再用旋蒸了
3.多糖样品里含有蛋白，影响大吗？
4.多糖在水里的溶解性不是很好，40ug/ml不够澄明，怎么办呢？
，，！！
如果是质量较好且批号较新的话,不用重蒸也能用的,重蒸用传统的水浴,刺型冷凝管冷却,大约180度,加点铝粉防氧化.
蒸的时候还要时不时的拿电吹风吹下接收头，冷下来了就很容易凝固，沾住接收头的。
拿超声超下可以溶的好点吗？
指教
现在在做呢，希望能做得好。
如果要求不是太苛刻.你可以用甘油浴蒸.蒸馏头直接接尾接管就可以.万一冷凝,可用电吹风加热.风
硫酸苯酚法重现性很差,对苯酚的要求很高.个人认为最好重蒸.
因为老硫酸苯酚法对苯酚的要求不高,为了提高重现性,新法对苯酚的纯度作了要求,即180度馏出部分.
另外对操作者要求也很高,
一是最好始终一人操作,以减少个人操作习惯带来的误差.
二是浓硫酸的滴加方式和速度:是加在液面上还是贴壁加入;是快加还是慢加,其结果都是不一样的,故操作方式一定要一致才能获得很好的重现性.
有人还提出了一阶导数法以减少样品颜色带来的误差．
总之，这方面的文献很多，你可以看一看．
我是新手，用到苯酚-硫酸法来测定多糖含量，遇到下面几个问题，请指教：
1.苯酚一定要重蒸馏吗？如果是新打开的可不可以不蒸馏啊？
2.如果重蒸，它沸点160，在水浴里减压蒸馏能蒸得出吗？我之前已经试过用减压旋蒸，可能是量少吧，都没有到接收瓶中，最多只在接头那里，后来怕它冷却后凝在不容易洗下来的地方就不敢再用旋蒸了
3.多糖样品里含有蛋白，影响大吗？
4.多糖在水里的溶解性不是很好，40ug/ml不够澄明，怎么办呢？
，，！！
我买的是结晶苯酚啊
硫酸苯酚法重现性很差,对苯酚的要求很高.个人认为最好重蒸.
因为老硫酸苯酚法对苯酚的要求不高,为了提高重现性,新法对苯酚的纯度作了要求,即180度馏出部分.
另外对操作者要求也很高,
一是最好始终一人操作,以减少个人操作习惯带来的误差.
二是浓硫酸的滴加方式和速度:是加在液面上还是贴壁加入;是快加还是慢加,其结果都是不一样的,故操作方式一定要一致才能获得很好的重现性.
有人还提出了一阶导数法以减少样品颜色带来的误差．
总之，这方面的文献很多，你可以看一看．
我也正在做多糖，苯酚-硫酸法测定多糖含量不是很稳定，我曾经做过该方法的条件试验，最后选择垂直悬空加硫酸，测定的吸收值高一些，以后一直采用该操作，而且是同一个人操作。
楼上说的也很有道理，可能苯酚需要重蒸。
你的多糖里蛋白质的含量高不高？我以前也研究过到底蛋白质对多糖的含量测定有没有影响，好像无明显区别。你也可以试试在多糖里面加一点对照蛋白测定，看有无差别。
一般，多糖的水溶性是很差，我试过的多糖含有一定水分的时候溶解性要比完全干燥下的好多了，所以可以控制一下水分。
关于你多糖溶解度的问题，首先你什么方法提取分离出来,你这个多糖在水里面溶解度太小了，所以要重新考虑你的提取方法. 一般来说,分子量大的溶解度就会小些,不过,你上面提到的溶解度确实有疑问的，因为到后面做NMR时30mg左右/ml的. 所以假如溶解度真很小的话，就需要考虑所选溶剂了.
关于你多糖溶解度的问题，首先你什么方法提取分离出来,你这个多糖在水里面溶解度太小了，所以要重新考虑你的提取方法. 一般来说,分子量大的溶解度就会小些,不过,你上面提到的溶解度确实有疑问的，因为到后面做NMR时30mg左右/ml的. 所以假如溶解度真很小的话，就需要考虑所选溶剂了.
我也想知道苯酚硫酸与蒽酮硫酸法有什么不同？苯酚不稳定，可否用蒽酮法来代替？香菇多糖法的局颁法中是硫酸水解后碘量法滴定的，即与单糖法类似，三种方法到底有什么不同？
大家都在说硫酸苯酚法重现性不好，方法误差大。本人做过两种多糖都是用的该方法，效果不错，线性方程中R＝0.9997～0.9998很正常，是不是大家需考虑一下你们的操作是否平行，最好把每个细节都能固定下来，相信你们就能得到很好的线性方程。
楼上老师您是怎么做的啊？
我单做标准曲线时r也只做到0.997-0.998，再测时重现性不太好啊
还有，我把多糖样品在水里溶解后测定，当时溶解还不错，越放置越不澄明了，隔了3天再测那个样品的吸光度，降到之前的1/10了.
我测的是复合多糖，配制的浓度是40ug/ml.
我最高也只能做到0.9987，苯酚没有经过重蒸。请教各位，如果要测定含量的多糖由甘露糖和葡萄糖（2：1）组成，选择什么对照品测定含量比较合适？
我想问蒸苯酚用电热套可不可以啊？
电热套应该可以吧，我用的就是，常压蒸馏，很快就到180度了，不过我想知道180度之前蒸馏出来的是什么成分？好像和180度之后收集的不太一样，溶解性也不是很好，知道的指教下，谢过了！
既然大家提到硫酸苯酚法了，我就想多嘴问一句体外话，
请问硫酸苯酚法可以作为糖类、糖苷类的定性反应吗？即如果我的样品加了硫酸苯酚后显深棕色，就表示里面一定存在糖吗？
！
我昨天做时没有重蒸馏苯酚。结果一塌糊涂，标准曲线R值只有0.9939。郁闷呀！而且我没加标准品的那只试管吸光值特高特高。比样品还高！请教各位哥哥姐姐了！
1.苯酚一定要重蒸馏吗？如果是新打开的可不可以不蒸馏啊？
2.如果重蒸，它沸点160，在水浴里减压蒸馏能蒸得出吗？我之前已经试过用减压旋蒸，可能是量少吧，都没有到接收瓶中，最多只在接头那里，后来怕它冷却后凝在不容易洗下来的地方就不敢再用旋蒸了
3.多糖样品里含有蛋白，影响大吗？
4.多糖在水里的溶解性不是很好，40ug/ml不够澄明，怎么办呢？
，，！！
如果是质量较好且批号较新的话,不用重蒸也能用的,重蒸用传统的水浴,刺型冷凝管冷却,大约180度,加点铝粉防氧化.
蒸的时候还要时不时的拿电吹风吹下接收头，冷下来了就很容易凝固，沾住接收头的。
拿超声超下可以溶的好点吗？
指教
现在在做呢，希望能做得好。
如果要求不是太苛刻.你可以用甘油浴蒸.蒸馏头直接接尾接管就可以.万一冷凝,可用电吹风加热.风
硫酸苯酚法重现性很差,对苯酚的要求很高.个人认为最好重蒸.
因为老硫酸苯酚法对苯酚的要求不高,为了提高重现性,新法对苯酚的纯度作了要求,即180度馏出部分.
另外对操作者要求也很高,
一是最好始终一人操作,以减少个人操作习惯带来的误差.
二是浓硫酸的滴加方式和速度:是加在液面上还是贴壁加入;是快加还是慢加,其结果都是不一样的,故操作方式一定要一致才能获得很好的重现性.
有人还提出了一阶导数法以减少样品颜色带来的误差．
总之，这方面的文献很多，你可以看一看．
我是新手，用到苯酚-硫酸法来测定多糖含量，遇到下面几个问题，请指教：
1.苯酚一定要重蒸馏吗？如果是新打开的可不可以不蒸馏啊？
2.如果重蒸，它沸点160，在水浴里减压蒸馏能蒸得出吗？我之前已经试过用减压旋蒸，可能是量少吧，都没有到接收瓶中，最多只在接头那里，后来怕它冷却后凝在不容易洗下来的地方就不敢再用旋蒸了
3.多糖样品里含有蛋白，影响大吗？
4.多糖在水里的溶解性不是很好，40ug/ml不够澄明，怎么办呢？
，，！！
我买的是结晶苯酚啊
硫酸苯酚法重现性很差,对苯酚的要求很高.个人认为最好重蒸.
因为老硫酸苯酚法对苯酚的要求不高,为了提高重现性,新法对苯酚的纯度作了要求,即180度馏出部分.
另外对操作者要求也很高,
一是最好始终一人操作,以减少个人操作习惯带来的误差.
二是浓硫酸的滴加方式和速度:是加在液面上还是贴壁加入;是快加还是慢加,其结果都是不一样的,故操作方式一定要一致才能获得很好的重现性.
有人还提出了一阶导数法以减少样品颜色带来的误差．
总之，这方面的文献很多，你可以看一看．
我也正在做多糖，苯酚-硫酸法测定多糖含量不是很稳定，我曾经做过该方法的条件试验，最后选择垂直悬空加硫酸，测定的吸收值高一些，以后一直采用该操作，而且是同一个人操作。
楼上说的也很有道理，可能苯酚需要重蒸。
你的多糖里蛋白质的含量高不高？我以前也研究过到底蛋白质对多糖的含量测定有没有影响，好像无明显区别。你也可以试试在多糖里面加一点对照蛋白测定，看有无差别。
一般，多糖的水溶性是很差，我试过的多糖含有一定水分的时候溶解性要比完全干燥下的好多了，所以可以控制一下水分。
关于你多糖溶解度的问题，首先你什么方法提取分离出来,你这个多糖在水里面溶解度太小了，所以要重新考虑你的提取方法. 一般来说,分子量大的溶解度就会小些,不过,你上面提到的溶解度确实有疑问的，因为到后面做NMR时30mg左右/ml的. 所以假如溶解度真很小的话，就需要考虑所选溶剂了.
关于你多糖溶解度的问题，首先你什么方法提取分离出来,你这个多糖在水里面溶解度太小了，所以要重新考虑你的提取方法. 一般来说,分子量大的溶解度就会小些,不过,你上面提到的溶解度确实有疑问的，因为到后面做NMR时30mg左右/ml的. 所以假如溶解度真很小的话，就需要考虑所选溶剂了.
我也想知道苯酚硫酸与蒽酮硫酸法有什么不同？苯酚不稳定，可否用蒽酮法来代替？香菇多糖法的局颁法中是硫酸水解后碘量法滴定的，即与单糖法类似，三种方法到底有什么不同？
大家都在说硫酸苯酚法重现性不好，方法误差大。本人做过两种多糖都是用的该方法，效果不错，线性方程中R＝0.9997～0.9998很正常，是不是大家需考虑一下你们的操作是否平行，最好把每个细节都能固定下来，相信你们就能得到很好的线性方程。
楼上老师您是怎么做的啊？
我单做标准曲线时r也只做到0.997-0.998，再测时重现性不太好啊
还有，我把多糖样品在水里溶解后测定，当时溶解还不错，越放置越不澄明了，隔了3天再测那个样品的吸光度，降到之前的1/10了.
我测的是复合多糖，配制的浓度是40ug/ml.
我最高也只能做到0.9987，苯酚没有经过重蒸。请教各位，如果要测定含量的多糖由甘露糖和葡萄糖（2：1）组成，选择什么对照品测定含量比较合适？
我想问蒸苯酚用电热套可不可以啊？
电热套应该可以吧，我用的就是，常压蒸馏，很快就到180度了，不过我想知道180度之前蒸馏出来的是什么成分？好像和180度之后收集的不太一样，溶解性也不是很好，知道的指教下，谢过了！
既然大家提到硫酸苯酚法了，我就想多嘴问一句体外话，
请问硫酸苯酚法可以作为糖类、糖苷类的定性反应吗？即如果我的样品加了硫酸苯酚后显深棕色，就表示里面一定存在糖吗？
！
我昨天做时没有重蒸馏苯酚。结果一塌糊涂，标准曲线R值只有0.9939。郁闷呀！而且我没加标准品的那只试管吸光值特高特高。比样品还高！请教各位哥哥姐姐了！