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大家什么情况下考虑用制备薄层?

时间: 2008-09-22 02:28:24 作者: 来源: 字号:
大家一般是在什么情况下考虑用制备薄层呢?量少的情况下或上柱不太好分离的样品?如果是这样的话,量少到什么程度开始考虑用制备薄层?但是有些既然薄层上能分开,为什么用制备薄层而不上柱呢?
制备薄层一般是有荧光的东西能跑成一条带时才考虑.样品量不太多一般一百多毫克,分析薄层上可以显示的点也不太多的时候才考虑制备吧,其它也要视情况而定。
因为薄层条件可以加酸,而上柱最好不要用酸,酸在回收浓缩时可能会富集,造成你样品可能会被水解掉。
个人认为,如果你TLC的条件够好,制备薄层得到的样品比上柱还要纯一些。缺点就是上样量太小,对点样技术要求高并且可能会有硅胶残留。
一般上硅胶柱分离时多为2元系统,如果你的样品用普通的二元系统在波层板上分得不理想,需要三元,四元,甚至五元系统时,上硅胶柱就很难满足了,所以考虑用制备薄层,另外,由于用于制备板的硅胶很细(柱效高),用硅胶柱分离可能分不开,但如果用制备薄层,可能分得很好。对于样品量的要求,我认为,由于制备薄层对样品的吸附可能比通过上柱对样品的吸附量要大(个人经验),所以用于制备薄层分离的样品量尽量多些,对于一块20*20的制备板,我们实验室所用硅胶的常用量为15g,载样量为50mg左右,如果所分的样品较纯,主要为1个点,那么这个点的量至少在10mg 以上。我曾用五元系统分离过,效果还不错。最后有酸碱时,一般过遍凝胶柱就可解决了。
mltx2006, '最后有酸碱时,一般过遍凝胶柱就可解决了"
想问一下, 是用sephadex lh-20,用甲醇-水吗?
感觉sephadex走的好慢,尤其是在有酸(还混有水在的时候),会不会加大发生反应的几率啊???
都是强人啊,学习中!
假如样品极性大,只能用甲醇极性以上的有机溶剂溶解,那就不适合用制备薄层了吧?因为大极性的溶剂有可能把黏合剂cmc-Na也溶解掉,影响打谱吧?
mltx2006

要三元,四元,甚至五元系统时,请问是如何筛选的,有什么原则吗

mltx2006

要三元,四元,甚至五元系统时,请问是如何筛选的,有什么原则吗

制备薄层比上柱子方便。但是损失很重,尤其是极性大的产物。纯度也很差。

我几乎从不用制备薄层。

制备薄层比上柱子方便。但是损失很重,尤其是极性大的产物。纯度也很差。

我几乎从不用制备薄层。


对于大极性的东西,似乎柱子也不太容易过,除非用分反相柱。
碎冰块战友对付大极性的东西有什么好办法么?请指教。

奥,知道了,碎冰块!
大极性的物质分离纯化难度很大,扩大产量上是个问题.
请教一下,请问高效液相分析的峰有托尾该怎么才能解决这种现象。
流动相是磷酸盐缓冲液(磷酸氢二氨0..132g,用磷酸调PH=7.0):乙睛 (400:60

大极性的物质分离纯化难度很大,扩大产量上是个问题.

suibingkuai老师你好,我最近在做大极性的物质分离纯化,从已分得成分看主要是甾体皂苷,带糖3-4个,有个很纳闷的问题,120g样上柱,用的是CHCl3-MeOH-H2O,冲到6:4:0.8了,好象没见有量大的东西下来,120g呀,何故?请指导!!
都是高人 要虚心学习

一般过柱子我用CHCl3-MeOH-H2O,有时加点HOAc。
选展开剂是有规律的,三角形规则相信很多人都知道的.制备薄层损失确实比较多,只要分离的效果比较好,最好是过柱子,几mg的样品都可以.如果只有几mg的样品还用制备薄层,你可以几乎都损失了.
制备薄层有以下几个原则:
1 溶解度要好,溶解度不好的话容易形成重复色带,很麻烦
2 极性不能够太大,大极性化合物拖尾严重,严重影响分离效果
3 依据你板的厚薄,上样量不能太大,上样太大会使分离效果明显降低
4 有合适的荧光或显色方法

以上思路都是我在工作中的总结,希望对你有所帮助!
向大家请教一下,我好不容易分得了几十毫克的混合物,而这个混合物中只含有两个成分,其中一个是我想要的,我想要的这个物质含有一个糖,极性偏大,不知道这种情况是不是可以用制备薄层,但是我又怕损失太多
冰蝶,我建议你最好不要所用制备薄层,因为赞扬损失的样品很大,而你的才几十毫克。你试试凝胶SEPHADEX LH-20或TOYOPEARL筛一下,不成功,那你可以采用HPLC分析,条件摸得好的话,然后用ODS半制备柱即可分离。
我前面一段时间也是用薄层制备分得了几十毫克混合物,上液相有三个峰,薄层板上显示两个很圆的斑点,只需要其中一个作为我的对照品,这个成份是一个生物碱类,但是极性是偏中等的,因为我在提取中用正丁醇萃取比氯仿萃取的效果好。现在也是在考虑要继续分,是再次薄层制备呢还是上柱子,上柱子是上硅胶柱好还是氧化铝柱好?氧化铝的吸附性较强,有点担心上柱子后要的成分被吸在上面,根本得不到了。
请问:我的样品在展开剂丙酮和水中展开,用水把样品溶下来,请问黏合剂cmc-Na也溶解掉吧?它在里面影响打谱吧? !
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