一直有这么一个困惑,不知道什么才是分配色谱的条件。应该不仅仅是氯仿甲醇加点水那么简单吧。不知道什么情况下才运用分配色谱。在正相板上氯仿甲醇5:1以下,比如4:1,3:1之类的情况下吗?
昨天我跑了两个小板,一个的体系是氯仿-甲醇-水(5:1:0.5)目标点的Rf约为0.6,于是我用了个氯仿-甲醇-水(10:1:1)的体系跑,目标化合物在原点没动。我这两个体系中的水都是起固定相作用吗?我感觉前一个体系水好像起的是酸的作用,后一个才是固定相的作用。
不知道各位高手能否指导下分配色谱的具体经验?
楼住好像对色谱法中按照分离原理的分类不是很清晰啊。
色谱法,又称层析法。根据其分离原理,有吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱与排阻色谱等方法。
吸附色谱是利用吸附剂对被分离物质的吸附能力不同,用溶剂或气体洗脱,以使组分分离。常用的吸附剂有氧化铝、硅胶、聚酰胺等有吸附活性的物质。
分配色谱是利用溶液中被分离物质在两相中分配系数不同,以使组分分离。其中一相为液体,涂布或使之键合在固体载体上,称固定相;另一相为液体或气体,称流动相。常用的载体有硅胶、硅藻土、硅镁型吸附剂与纤维素粉等。
离子交换色谱是利用被分离物质在离子交换树脂上的离子交换势不同而使组分分离。常用的有不同强度的阳、阴离子交换树脂,流动相一般为水或含有有机溶剂的缓冲液。
排阻色谱又称凝胶色谱或凝胶渗透色谱,是利用被分离物质分子量大小的不同和在填料上渗透程度的不同,以使组分分离。常用的填料有分子筛、葡聚糖凝胶、微孔聚合物、微孔硅胶或玻璃珠等,可根据载体和试样的性质,选用水或有机溶剂为流动相。
色谱法的分离方法,有柱色谱法、纸色谱法、薄层色谱法、气相色谱法、高效液相色谱法等。
根据你说的情况,你应该跑的是硅胶板啊,应该是属于吸附色谱,水在这里只是起到调节极性的作用。而且两种展开剂的极性相差很小,可以说就是一种展开剂啊,所以在Rf值上不会有太大的差别的。
to 笑面书生
经典的薄层体系:氯仿-甲醇-水 7:3:1.里面的水只是调节极性用的么?那怎么才是分配色谱色谱薄层体系和分配色谱板呢?
昨天我跑了两个小板,一个的体系是氯仿-甲醇-水(5:1:0.5)目标点的Rf约为0.6,于是我用了个氯仿-甲醇-水(10:1:1)的体系跑,目标化合物在原点没动。我这两个体系中的水都是起固定相作用吗?我感觉前一个体系水好像起的是酸的作用,后一个才是固定相的作用。
不知道各位高手能否指导下分配色谱的具体经验?
楼住好像对色谱法中按照分离原理的分类不是很清晰啊。
色谱法,又称层析法。根据其分离原理,有吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱与排阻色谱等方法。
吸附色谱是利用吸附剂对被分离物质的吸附能力不同,用溶剂或气体洗脱,以使组分分离。常用的吸附剂有氧化铝、硅胶、聚酰胺等有吸附活性的物质。
分配色谱是利用溶液中被分离物质在两相中分配系数不同,以使组分分离。其中一相为液体,涂布或使之键合在固体载体上,称固定相;另一相为液体或气体,称流动相。常用的载体有硅胶、硅藻土、硅镁型吸附剂与纤维素粉等。
离子交换色谱是利用被分离物质在离子交换树脂上的离子交换势不同而使组分分离。常用的有不同强度的阳、阴离子交换树脂,流动相一般为水或含有有机溶剂的缓冲液。
排阻色谱又称凝胶色谱或凝胶渗透色谱,是利用被分离物质分子量大小的不同和在填料上渗透程度的不同,以使组分分离。常用的填料有分子筛、葡聚糖凝胶、微孔聚合物、微孔硅胶或玻璃珠等,可根据载体和试样的性质,选用水或有机溶剂为流动相。
色谱法的分离方法,有柱色谱法、纸色谱法、薄层色谱法、气相色谱法、高效液相色谱法等。
根据你说的情况,你应该跑的是硅胶板啊,应该是属于吸附色谱,水在这里只是起到调节极性的作用。而且两种展开剂的极性相差很小,可以说就是一种展开剂啊,所以在Rf值上不会有太大的差别的。
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经典的薄层体系:氯仿-甲醇-水 7:3:1.里面的水只是调节极性用的么?那怎么才是分配色谱色谱薄层体系和分配色谱板呢?