我用2cm硅胶柱子过200mg样品,我分离的是氯仿萃取部分,用的石油醚:乙酸乙酯洗脱,可以看到明显的颜色分段,但是确实是量太少,冲出来的洗脱液根本看不到颜色,不知道用洗脱原液能不能点TLC,浓度太低量太少是不是会点不出来?本身收集的量每分也只有10ml,好像也没办法浓缩。而且按颜色分段收集后还有很大部分没分出来,换不同极性的洗脱液也洗不下来,最后用乙酸乙酯洗可以洗脱下来但很慢,也没见有分段。都用了10倍洗脱体积量了还吸附有很多,冲洗下来的洗脱液也看不到颜色。洗不下来的部分是杂质吗?本来萃取得到的东西就少,还吸附大部分没洗下来,都不知道该怎么办了。忘高手们指点指点。!
洗脱液是不是得在原液TLC的结果基础上确定?是不是因为你用的洗脱剂不合适才会洗不下来?
估计是洗脱剂问题~~
我分的是氯仿萃取部分。用石油醚:乙酸乙酯跑TLC时能跑开,原点也还能看到有物质,请教那我应该换哪种展开洗脱系统呢?
可以采用梯度洗脱,用乙酸乙酯可以洗出,但不快,说明极性还不够,您可以用氯仿/甲醇系统,不同梯度洗脱即可,最后用甲醇洗柱,可以把高极性部分洗出,还不行的话,可以在甲醇里加点水,但不建议这样做,,
可以采用梯度洗脱,用乙酸乙酯可以洗出,但不快,说明极性还不够,您可以用氯仿/甲醇系统,不同梯度洗脱即可,最后用甲醇洗柱,可以把高极性部分洗出,还不行的话,可以在甲醇里加点水,但不建议这样做,,
请教一般粗分时氯仿/甲醇系统的梯度洗脱比例是怎样分的呢?
另外:甲醇洗柱子会不会把柱子溶了,因为我看论坛里有人说用甲醇冲硅胶柱结果把硅胶柱溶了。
我们一般以3~5%甲醇为起始,直到加到10%,再到15%,
甲醇冲硅胶柱结果把硅胶柱溶了???
这是不可能的,我们常用纯甲醇洗柱,以便再次使用,
我们一般以3~5%甲醇为起始,直到加到10%,再到15%。
再请教一下,你说的3~5%甲醇是不是就是氯仿:甲醇100:3-5,我没试过这个系统,如果点TLC也用这个比例吗?!
洗脱液是不是得在原液TLC的结果基础上确定?是不是因为你用的洗脱剂不合适才会洗不下来?
估计是洗脱剂问题~~
我分的是氯仿萃取部分。用石油醚:乙酸乙酯跑TLC时能跑开,原点也还能看到有物质,请教那我应该换哪种展开洗脱系统呢?
可以采用梯度洗脱,用乙酸乙酯可以洗出,但不快,说明极性还不够,您可以用氯仿/甲醇系统,不同梯度洗脱即可,最后用甲醇洗柱,可以把高极性部分洗出,还不行的话,可以在甲醇里加点水,但不建议这样做,,
可以采用梯度洗脱,用乙酸乙酯可以洗出,但不快,说明极性还不够,您可以用氯仿/甲醇系统,不同梯度洗脱即可,最后用甲醇洗柱,可以把高极性部分洗出,还不行的话,可以在甲醇里加点水,但不建议这样做,,
请教一般粗分时氯仿/甲醇系统的梯度洗脱比例是怎样分的呢?
另外:甲醇洗柱子会不会把柱子溶了,因为我看论坛里有人说用甲醇冲硅胶柱结果把硅胶柱溶了。
我们一般以3~5%甲醇为起始,直到加到10%,再到15%,
甲醇冲硅胶柱结果把硅胶柱溶了???
这是不可能的,我们常用纯甲醇洗柱,以便再次使用,
我们一般以3~5%甲醇为起始,直到加到10%,再到15%。
再请教一下,你说的3~5%甲醇是不是就是氯仿:甲醇100:3-5,我没试过这个系统,如果点TLC也用这个比例吗?!