C18反相柱,由于样品极性小,形成吸附,怎么样处理掉吸附的颜色~
先用甲醇冲洗,再换成乙酸乙酯冲洗,如果不行,再用二氯甲烷,最后要记得用甲醇再次冲洗,应该可以搞定
对 先用甲醇冲洗,再换成乙酸乙酯冲洗,如果不行,再用二氯甲烷,最后要记得用甲醇再次冲洗,应该可以搞定
如果样品的极性小到甲醇都冲不下来,可以在甲醇中加入少量氯仿,一般100:1足够了,样品往往会分离得很好,而且基本上不伤柱子。
如果直接用氯仿冲是不特别损坏柱子啊?
当然了。
您好,顺便问一句,如果样品极性小(100%可以出峰),而且甲醇溶解性不好,是不是可以用甲醇:氯仿=99:1 呀?
是这样的,流动相的选择当然是以RF值为依据,而不是看样品溶解性的大小。在流动相中的溶解性不好,是很多样品常见到的问题。一般可以选择以下几个方法解决:
1. 混悬上样,分离效果当然会受到影响,但分离结果也还可以接受。
2. 用反相硅胶拌样。 分离效果不错,只是成本高了一点。
3. 用高浓度甲醇上样。 比如用30%甲醇冲柱,可以用50%甲醇溶解,样品当然会被冲下一段,但只要50%甲醇所用体积不是太大,样品很快还是会被硅胶吸附住的。只是相当于柱子短了一些。
飞扬跋扈为谁雄,可能我的问题描述的不是很清楚。是这样的,我的样品极性非常小,液相已经试过甲醇:水=9:1,不出峰。100%可以很好的分离,但是柱压很高。原因是我的物质甲醇溶解性很差,所以我想加入一点氯仿来增加样品溶解度进行液相制备。不知道可行不?
道理还是一样的:如果加少量氯仿后分离度仍然能够满意的话,应该也是可以的。只不过引入氯仿后保留时间和分离度当然要有影响,同时这种小极性的化合物上反相只怕会有损失,而且氯仿对柱子总是有损伤的。既然极性这么小,为什么不用正相柱制备呢?或者考虑一下其它方法啊。毕竟对这种小极性物质,反相柱不是首选方案啊。呵呵。
我用正相柱分过,但是很难分纯。液相正相柱很少,正相液相制备就更少了,不知道下一步如何进行呢
如果楼上的朋友不心痛柱子的话,加一点氯仿也可以啊,只是加入氯仿后分离效果保留时间和分离度能不能满意就不好说了。另外,我们组上反相时,小极性化合物如果跑不动,往往试试丙酮。楼上可以参考一下。
先用甲醇冲洗,再换成乙酸乙酯冲洗,如果不行,再用二氯甲烷,最后要记得用甲醇再次冲洗,应该可以搞定
对 先用甲醇冲洗,再换成乙酸乙酯冲洗,如果不行,再用二氯甲烷,最后要记得用甲醇再次冲洗,应该可以搞定
如果样品的极性小到甲醇都冲不下来,可以在甲醇中加入少量氯仿,一般100:1足够了,样品往往会分离得很好,而且基本上不伤柱子。
如果直接用氯仿冲是不特别损坏柱子啊?
当然了。
您好,顺便问一句,如果样品极性小(100%可以出峰),而且甲醇溶解性不好,是不是可以用甲醇:氯仿=99:1 呀?
是这样的,流动相的选择当然是以RF值为依据,而不是看样品溶解性的大小。在流动相中的溶解性不好,是很多样品常见到的问题。一般可以选择以下几个方法解决:
1. 混悬上样,分离效果当然会受到影响,但分离结果也还可以接受。
2. 用反相硅胶拌样。 分离效果不错,只是成本高了一点。
3. 用高浓度甲醇上样。 比如用30%甲醇冲柱,可以用50%甲醇溶解,样品当然会被冲下一段,但只要50%甲醇所用体积不是太大,样品很快还是会被硅胶吸附住的。只是相当于柱子短了一些。
飞扬跋扈为谁雄,可能我的问题描述的不是很清楚。是这样的,我的样品极性非常小,液相已经试过甲醇:水=9:1,不出峰。100%可以很好的分离,但是柱压很高。原因是我的物质甲醇溶解性很差,所以我想加入一点氯仿来增加样品溶解度进行液相制备。不知道可行不?
道理还是一样的:如果加少量氯仿后分离度仍然能够满意的话,应该也是可以的。只不过引入氯仿后保留时间和分离度当然要有影响,同时这种小极性的化合物上反相只怕会有损失,而且氯仿对柱子总是有损伤的。既然极性这么小,为什么不用正相柱制备呢?或者考虑一下其它方法啊。毕竟对这种小极性物质,反相柱不是首选方案啊。呵呵。
我用正相柱分过,但是很难分纯。液相正相柱很少,正相液相制备就更少了,不知道下一步如何进行呢
如果楼上的朋友不心痛柱子的话,加一点氯仿也可以啊,只是加入氯仿后分离效果保留时间和分离度能不能满意就不好说了。另外,我们组上反相时,小极性化合物如果跑不动,往往试试丙酮。楼上可以参考一下。