在硅胶柱层析的时候，开始平整的色带突然不平整了，而且有一段的色带似乎没有移动，而其他地方的色带还在移动。想请教一下，出现这种情况是什么原因？会不会对分离有很严重的影响？

PS:我的上样量约15g，用的是石油醚：乙酸乙酯梯度洗脱，上述现象是在8：2洗脱的过程中出现的
1.我觉得可能是你装的柱子不太好，一边松一边实，因为松的这边在洗脱剂对样品洗脱时下移速度会比较快，而实的那边移动的慢，所以随着色谱带的下移，这种差距会越来越大，看上去色谱带就不平整
2.色谱带不平整会造成分离的流分之间会有交叉，这种情况虽然不可避免的，但是把柱子装好使整根柱子的松实程度一致，色谱带会好很多，流分之间的交叉也会比较少。建议装柱子时可用按摩棒从柱子底部四周均匀振动敲打压实硅胶，直到硅胶柱的上表面不再下移，然后小心加入样品。
个人观点，呵呵！
这可能与化合物中某一组分和硅胶的结合力太强有关，所以后面的点可能先出来或与前面的点同时出来，这时需要更换洗脱剂。
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