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戊二醛交联白蛋白后为什么大量沉淀?

时间: 2008-09-27 02:36:14 作者: 来源: 字号:
我用的是2.5%和25%的戊二醛分别几十微升交联几毫升的蛋白溶液,可是都会产生絮状沉淀。不知道为何与文献差别这么大,没有文章提过。想请大家谈谈交联的体会,我很是困惑。
醛基与蛋白上的氨基缩合,形成双键,这个反应无特异性,既可以分子内也可以分子间,所以最终将会生成多聚蛋白,如果戊二醛浓度过高,或者未能及时混匀,可能形成分子量过大的聚合物沉淀。建议用低浓度的戊二醛溶液,持续搅拌下缓慢滴入,必要时可以预加赖氨酸控制交联速度,交联后可以加入还原剂增加稳定性
请问大家,在加乙醇后,加戊二醛之前,溶液呈什么状态呢?有乳光的?还是混浊的?我按一篇中文文献做, 结果加完乙醇后,溶液就成混浊的状态,白蛋白絮凝成了大的粒子. 关于制备小粒径的白蛋白纳米粒的方法,大家有什么好的建议吗?
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