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聚酰胺柱层析的应用

时间: 2008-09-25 02:21:36 作者: 来源: 字号:
各位老师,请教关于聚酰胺应用问题:
1)对于植物总提物,根据什么判断使用聚酰胺(比如观察紫外下的薄层斑点情况)?
2)总提物的粗分,聚酰胺上样按什么比例?比如预粗分60g样品需装柱多少,按体积还是重量?
3) 上样分离需不需要拌样,用什么拌,需要多少量?
因为首次分离乙酸乙酯总提物感到很困惑,急需帮助!

我来说说基础问题吧,希望对你有帮助

聚酰胺品种有很多,常用的是锦纶6和锦纶66,都有较好的亲水性和 亲脂性,可分离一些水溶性和脂溶性物质,如酚类、硝基化合物、醌类、氨基酸、核酸、杂环化合物等。

柱色谱用的聚酰胺其分子量大小一般最好选用在15000-20000,分子量太小的在常用的有机溶剂当中溶解度较大,在处理过程中也易被酸、碱破坏,而且还溶于洗脱剂中污染分离样品。分子量太大也不适合分离样品。

聚酰胺内的酰胺键,它们与酚类、硝基化合物、醌类、氨基酸、核酸、杂环化合物等形成氢键,因而对这些物质产生吸附作用!

聚酰胺有较高的样品容量,一般100ml可上样2.0g左右。拌样就像硅胶拌样一样或者湿法加到柱子上,前提是你的样品在装柱的流动相中溶解度很好。样品最好用洗脱液溶解(流动相)拌样,浓度一般控制在20-30%。 对于难溶的样品可用易挥发的溶剂甲醇、乙醚、丙酮等溶解用聚酰胺吸附,减压蒸去溶剂,将附有样品的聚酰胺最后上柱。我装柱一般是按体积的。


本人建议不要用这种材料,分离效果差,吸附严重。
严重感谢楼上两位,能不能分好不管它,先试一把!
最好用干法上样啊,。我前天上了一根柱,聚酰胺的,用了湿法,现在好惨啊!样品都用壁上洗下来的。洗得太样衰啦!
还有我用醇水洗得,开始的那个梯度不要那么大好,我直接上了,40%,感觉过大了。也还好我是打算粗分。
请问老师你那个湿法上样这么会那样了,我的是谁提取的东西,就直接上样了啊
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