我现在用Agilent 1200系列做制备分离，我的样品只在210nm有吸收，可以看见很好的分离峰，但用自动接样器收集样品的时候，计算机却只认254nm的峰，所以根本收不到任何东西。我们重新设置了DAD的检测波长，不管如何更改，fraction collector还是只认254nm的峰。我们也打电话问了Agilent的工程师，他们说是我样品太少，吸收不强，我的样品60mg，不算少，但吸收是不强。
不知有没有同行遇到相似的问题？如何解决？***有经验的高手给一条明路！！！我必须要在8月份之前得到纯化合物，否则老板就会让我停掉这个项目，心疼呀！
手动接收好啦，干吗非得用自动接收。
我们开始想的也是用手动接受，但我们的样品有点特殊，它在TLC板上只显一个点，但HPLC分析有7个比较明显的峰，而且靠的都很近，用手动恐怕还是分不开，毕竟有个时间差在里面，因为那7个峰都是挨在一起，非常靠近的，相互之间没什么保留时间。
你的答复！请大家再帮我出出主意，了！
干吗时间不拉长一点？时间拉长还这样，恐怕也无法分开。这种情况用自动收集更是分不开。我经常做制备，自动收集仪都不用。
换下条件，看能不能把峰拉开点，我们实验室也是手动接
是那里的加我QQ 94736573 我学习一下制备
样品太少，吸收不强！工程师说的没错！
不管对于多少量样品来说，吸收不强都很可能收集不到；这种样品我碰到过很多，一般不敢去做UV检测的制备HPLC，一般用MS导向分离。

有两个问题：
1.您说你的样品210nm吸收弱，请问在分析HPLC上有多大强度？
2. 请问lz的HPLC收集器收集样品的“UV感应值”（就这个意思，英文忘了）设的是多少？是否还可以设低点？设低点能收到么？

“60mg样品”有7个比较明显的峰，一个峰可能10mg的量可能都不到，分离条件又有限，我劝lz尽快放弃这个样品，不要再浪费时间了。
如果这个峰非要不可，唯一的办法也只有重新提点药材富集多些.....但是谁又会去做呢？
为什么非要这个峰不可呢？
兄弟，不要急躁，慢慢道来.....
试试凝胶，基本上不损失样品，效果可能会更好些，因为里面有254吸收的物质，和你想要的东东不同类。
另外，可能你的东西已经是纯的了，做个LC/MS看看是不是一个comp。
最后，还是那句话不要急躁，改变不了的事多些宽容，勇于去挑战其它难题。

世上只有三种事：上帝的事，自己的事，别人的事；上帝的事我们管不了，自己的事要努力做好，别人的事有时可以分担。
如果东西分不出来，老板又停掉项目，那时这件事就是上帝的事。