小生是刚进实验室的，现在需要用到反相柱，但是这次使用是初次使用，对反相柱的使用方法以及注意事项不怎么清楚。
请求大侠相助！在此表示不甚感激！
1）首先，可以用反相板摸好洗脱条件，一般都是水醇系统，应确定好比例；
2）将样品溶于洗脱剂中，尽量用较少的洗脱剂溶解最多的样品，而且上样液一定要是透明的液体；
3）上柱，要缓慢，不要让样品的色带太宽；
4）洗脱，接流分。
1）HPLC摸条件，一般15-30分钟之内出峰效果会比较好。
2）样品也可以拌样上柱（自己填料的话），效果会比液体上样好。
3）洗脱可以等梯度洗脱，也可以梯度洗脱。
4）样品下来后，用甲醇或乙氰（多用甲醇）洗柱子。
我们没有反相板啊，郁闷
反相板不贵的，至少比你用的填料便宜，而且用的好的话可以使用多次。
用这个摸条件比用HPLC来得更快。
zzpsea您好，我现在就是在摸反相柱条件时出现问题：
我用HPLC进行摸条件时，怎么确定上反相柱应该用多大极性的甲醇水系统进行洗脱

zzpsea您好，我现在就是在摸反相柱条件时出现问题：
我用HPLC进行摸条件时，怎么确定上反相柱应该用多大极性的甲醇水系统进行洗脱