我最近在做多糖结构鉴定之一的气相色谱分析，在上气相前多糖样品和单糖混合对照都要做衍生化。
我先做的对照，我是按下面的方法来做的：
1、各取单糖对照10mg，用2ml水溶解，加入30mg硼氢化钠于60度还原1小时
2、加36％的甲酸至无气泡，除去多于的硼氢化钠，于45度，旋转蒸干
3、加入3ml甲醇溶解，再蒸干，反复洗6次，以除去硼酸根
4、于45度真空干燥过夜
5、加入2ml醋酐——吡啶（1：1），于100度乙酰化1小时
注：这时就出现不溶
6、用氮气除去反应液，并于45度真空干燥2小时
7、用5ml的二氯甲烷溶解
注：底部有大量粉末状沉淀，不溶
8、过滤，上液相检测0—10min有2团分不开的峰，10min后无任何峰
注：我怀疑我的样品只进行了还原，根本没有乙酰化，因为不溶
我想请教各位我做的方法有问题吗？为什么我做出来的东西不溶？
我的样品用
1、2ml 2mol/L 的硫酸于100度水解8小时
2、用碳酸钡中和至无气泡产生，PH接近中性
3、加入少量水后离心，取上清，过滤
以后的步骤都根对照的一样。
最后也是用二氯甲烷溶解，也是不溶，过滤后上气相检测没有任何峰。
我用三甲基硅醚化要比您这个方法简单而方便.
你的实验条件是不是再考虑一下.
请问三甲基硅醚化这个方法是不是适合所有的多糖呢？
而且我也想搞明白我做的全乙酰化糖醇衍生物为什么会失败，因为我之后要做甲基化分析，用到的水解、还原和乙酰化方法跟我现在用的方法是一样的。
不管是水解-三甲基硅醚化还是水解-还原-乙酰化,都有成熟的实验步骤.
看来我是要再考虑一下我的实验方法了。各位的帮助。
我最近在做多糖结构鉴定之一的气相色谱分析，在上气相前多糖样品和单糖混合对照都要做衍生化。
我先做的对照，我是按下面的方法来做的：
1、各取单糖对照10mg，用2ml水溶解，加入30mg硼氢化钠于60度还原1小时
2、加36％的甲酸至无气泡，除去多于的硼氢化钠，于45度，旋转蒸干
3、加入3ml甲醇溶解，再蒸干，反复洗6次，以除去硼酸根
4、于45度真空干燥过夜
5、加入2ml醋酐——吡啶（1：1），于100度乙酰化1小时
注：这时就出现不溶
6、用氮气除去反应液，并于45度真空干燥2小时
7、用5ml的二氯甲烷溶解
注：底部有大量粉末状沉淀，不溶
8、过滤，上液相检测0—10min有2团分不开的峰，10min后无任何峰
注：我怀疑我的样品只进行了还原，根本没有乙酰化，因为不溶
方法可能出现的问题：醋酐的量少，反映注意震荡。并且在萃取时，要用蒸馏水多洗涤几次，把未乙酰化的洗涤出来，把二氯甲烷溶解的物质上GC即可
有一种用1-甲基咪唑催化的糖醇乙酰化反应，不知道有人用过没
问题出在，到最后应该再加上一步用蒸馏水洗涤三次即可.
一年前做过次类实验，开始和一样，重现性很差，共享一下：
衍生化GC测糖类方法很成熟，当时我也试了好几种：甲基硅烷化；氢化还原－乙酰化；以及“吁吁大白兔”提到的1-甲基咪唑催化的糖醇乙酰化反应。
个人总结起来如下：
①甲基硅烷化方法最简单，但由于衍生后容易产生异构体，对分析不太方便；
②用的氢化还原－乙酰化的方法比较经典，但是反应条件控制要严，特别是乙酰化一定要保证无水环境（有水的话反应不能进行，不过拿到的不溶性粉末如果是不溶于极型溶剂的话，个人感觉就是乙酰化的产物，当然，当时我制备纯化了好种单糖的乙酰化产物，用来定位），如果不行的话看看你反应控制的怎么样，我得经验是在无水条件下乙酰化。
③1－甲基咪唑具有以上二者的优点，反应简单，而且乙酰化产物单一。
10mg单糖还原后，干燥后感觉固体量大吗，你可以称一下还原前后的重量，如果质量差别太大的话，有可能还原那一步处理有问题，至于乙酰化是相对简单的反应。
祝你好运！
我先做的对照，我是按下面的方法来做的：
1、各取单糖对照10mg，用2ml水溶解，加入30mg硼氢化钠于60度还原1小时
2、加36％的甲酸至无气泡，除去多于的硼氢化钠，于45度，旋转蒸干
3、加入3ml甲醇溶解，再蒸干，反复洗6次，以除去硼酸根
4、于45度真空干燥过夜
5、加入2ml醋酐——吡啶（1：1），于100度乙酰化1小时
注：这时就出现不溶
6、用氮气除去反应液，并于45度真空干燥2小时
7、用5ml的二氯甲烷溶解
注：底部有大量粉末状沉淀，不溶
8、过滤，上液相检测0—10min有2团分不开的峰，10min后无任何峰
注：我怀疑我的样品只进行了还原，根本没有乙酰化，因为不溶
我想请教各位我做的方法有问题吗？为什么我做出来的东西不溶？
我的样品用
1、2ml 2mol/L 的硫酸于100度水解8小时
2、用碳酸钡中和至无气泡产生，PH接近中性
3、加入少量水后离心，取上清，过滤
以后的步骤都根对照的一样。
最后也是用二氯甲烷溶解，也是不溶，过滤后上气相检测没有任何峰。
我用三甲基硅醚化要比您这个方法简单而方便.
你的实验条件是不是再考虑一下.
请问三甲基硅醚化这个方法是不是适合所有的多糖呢？
而且我也想搞明白我做的全乙酰化糖醇衍生物为什么会失败，因为我之后要做甲基化分析，用到的水解、还原和乙酰化方法跟我现在用的方法是一样的。
不管是水解-三甲基硅醚化还是水解-还原-乙酰化,都有成熟的实验步骤.
看来我是要再考虑一下我的实验方法了。各位的帮助。
我最近在做多糖结构鉴定之一的气相色谱分析，在上气相前多糖样品和单糖混合对照都要做衍生化。
我先做的对照，我是按下面的方法来做的：
1、各取单糖对照10mg，用2ml水溶解，加入30mg硼氢化钠于60度还原1小时
2、加36％的甲酸至无气泡，除去多于的硼氢化钠，于45度，旋转蒸干
3、加入3ml甲醇溶解，再蒸干，反复洗6次，以除去硼酸根
4、于45度真空干燥过夜
5、加入2ml醋酐——吡啶（1：1），于100度乙酰化1小时
注：这时就出现不溶
6、用氮气除去反应液，并于45度真空干燥2小时
7、用5ml的二氯甲烷溶解
注：底部有大量粉末状沉淀，不溶
8、过滤，上液相检测0—10min有2团分不开的峰，10min后无任何峰
注：我怀疑我的样品只进行了还原，根本没有乙酰化，因为不溶
方法可能出现的问题：醋酐的量少，反映注意震荡。并且在萃取时，要用蒸馏水多洗涤几次，把未乙酰化的洗涤出来，把二氯甲烷溶解的物质上GC即可
有一种用1-甲基咪唑催化的糖醇乙酰化反应，不知道有人用过没
问题出在，到最后应该再加上一步用蒸馏水洗涤三次即可.
一年前做过次类实验，开始和一样，重现性很差，共享一下：
衍生化GC测糖类方法很成熟，当时我也试了好几种：甲基硅烷化；氢化还原－乙酰化；以及“吁吁大白兔”提到的1-甲基咪唑催化的糖醇乙酰化反应。
个人总结起来如下：
①甲基硅烷化方法最简单，但由于衍生后容易产生异构体，对分析不太方便；
②用的氢化还原－乙酰化的方法比较经典，但是反应条件控制要严，特别是乙酰化一定要保证无水环境（有水的话反应不能进行，不过拿到的不溶性粉末如果是不溶于极型溶剂的话，个人感觉就是乙酰化的产物，当然，当时我制备纯化了好种单糖的乙酰化产物，用来定位），如果不行的话看看你反应控制的怎么样，我得经验是在无水条件下乙酰化。
③1－甲基咪唑具有以上二者的优点，反应简单，而且乙酰化产物单一。
10mg单糖还原后，干燥后感觉固体量大吗，你可以称一下还原前后的重量，如果质量差别太大的话，有可能还原那一步处理有问题，至于乙酰化是相对简单的反应。
祝你好运！