如题,新手上路,^_^
第一次做这个实验
sephadex LH-20,样品10mg以下,1ml以下
柱子直径1cm,高30cm,是不是就称5.88g基质(用3.14×0.5×0.5×30/3.8=5.88g)溶胀?
请问从装柱到全部洗脱下来,大概得几个小时啊?
要头天晚上溶胀,第二天早晨装柱吗?(用氯仿甲醇体系洗脱的话,是不是就可以用氯仿甲醇溶胀?这两种溶剂在说明书中的说明都是3.8-4.1)
能装好柱之后,放一晚上,第二天再平衡可以吗?
做完之后要马上用纯甲醇冲柱子吗?放一晚上可以吗?
各位老师
1、这个柱子装的太短了,建议你装到60cm以上。
2、计算的方法中,应该加上大约10%的富裕量,主要是在装柱过程中的损失。
3、可以用甲醇氯仿直接溶胀,冬天了,最好溶胀过夜,第二天装柱。可以装柱后第二天平衡。
4、要养成好的习惯,做完实验一定要多冲一下柱子,这样寿命长。
5、具体的洗脱时间,需要跟样品粘度,装柱压力(装柱的密实程度)有关。
啊,短了。。。
如果装60cm以上的话,10g填料根本就不够用啊~~
一个包装不是10g吗?
又要去买啊。。。
我也用的1*30cm的柱子,胶溶涨很小,用了15g才差不多装慢了,而且,我是用60%乙醇装柱的,后来用100%甲醇洗脱,结果胶缩了1/3,不知道是咋回事?sephadex LH-20,是进口的,是买的胶有问题,还是啥原因?遇到没有啊?
是因为sephadex LH20在不同溶剂中溶涨系数不同吧,在水,乙醇,甲醇中都有不同的溶涨系数,是不是因为甲醇的和乙醇相差很大造成的?
第一次做这个实验
sephadex LH-20,样品10mg以下,1ml以下
柱子直径1cm,高30cm,是不是就称5.88g基质(用3.14×0.5×0.5×30/3.8=5.88g)溶胀?
请问从装柱到全部洗脱下来,大概得几个小时啊?
要头天晚上溶胀,第二天早晨装柱吗?(用氯仿甲醇体系洗脱的话,是不是就可以用氯仿甲醇溶胀?这两种溶剂在说明书中的说明都是3.8-4.1)
能装好柱之后,放一晚上,第二天再平衡可以吗?
做完之后要马上用纯甲醇冲柱子吗?放一晚上可以吗?
各位老师
1、这个柱子装的太短了,建议你装到60cm以上。
2、计算的方法中,应该加上大约10%的富裕量,主要是在装柱过程中的损失。
3、可以用甲醇氯仿直接溶胀,冬天了,最好溶胀过夜,第二天装柱。可以装柱后第二天平衡。
4、要养成好的习惯,做完实验一定要多冲一下柱子,这样寿命长。
5、具体的洗脱时间,需要跟样品粘度,装柱压力(装柱的密实程度)有关。
啊,短了。。。
如果装60cm以上的话,10g填料根本就不够用啊~~
一个包装不是10g吗?
又要去买啊。。。
我也用的1*30cm的柱子,胶溶涨很小,用了15g才差不多装慢了,而且,我是用60%乙醇装柱的,后来用100%甲醇洗脱,结果胶缩了1/3,不知道是咋回事?sephadex LH-20,是进口的,是买的胶有问题,还是啥原因?遇到没有啊?
是因为sephadex LH20在不同溶剂中溶涨系数不同吧,在水,乙醇,甲醇中都有不同的溶涨系数,是不是因为甲醇的和乙醇相差很大造成的?