最近上了一个氯仿柱子,成分是萜类,用甲醇拌样,进样前先用的纯氯仿洗脱,流速大概在三秒一滴.但是进样后又用氯仿洗脱时,速度变的特别特别的慢,基本上不流.后来又重新装了一个柱子,进样后直接用流动相
氯仿-甲醇(20:1)洗脱,出现了同样的问题.请问这是什么原因呢?可以怎样解决呢?帮助!
是小柱子吧,加压(从上面),或者减压(从下面)
你用的是多少目硅胶,太细的话只好加压了。
先是用的100目的硅胶拌样,300目硅胶装的柱子,未上样品前,柱子流速正常,待样品上后,柱子流速马上减缓至每1min1drop,
后又重新装咯一个柱子,采取用少量溶剂溶解样品直接上样,效果仍然不佳.
请问这会是什么原因呢??
加压试过,不见效!
样品溶解度不好吧,或者粘度过大。
换溶剂,或者加压。
可能是样品溶的不好就拌样了,堵柱子了,可以用较大量的硅胶拌样,用少量硅胶装柱,然后梯度洗脱,靠溶剂的极性分离
硅胶与样品的搅拌比例是多少啊,如果硅胶量小,上柱后,变粘,溶剂不宜洗脱
物质在氯仿中的溶解度太小,直接换较大极性的洗脱剂
氯仿-甲醇(20:1)洗脱,出现了同样的问题.请问这是什么原因呢?可以怎样解决呢?帮助!
是小柱子吧,加压(从上面),或者减压(从下面)
你用的是多少目硅胶,太细的话只好加压了。
先是用的100目的硅胶拌样,300目硅胶装的柱子,未上样品前,柱子流速正常,待样品上后,柱子流速马上减缓至每1min1drop,
后又重新装咯一个柱子,采取用少量溶剂溶解样品直接上样,效果仍然不佳.
请问这会是什么原因呢??
加压试过,不见效!
样品溶解度不好吧,或者粘度过大。
换溶剂,或者加压。
可能是样品溶的不好就拌样了,堵柱子了,可以用较大量的硅胶拌样,用少量硅胶装柱,然后梯度洗脱,靠溶剂的极性分离
硅胶与样品的搅拌比例是多少啊,如果硅胶量小,上柱后,变粘,溶剂不宜洗脱
物质在氯仿中的溶解度太小,直接换较大极性的洗脱剂