现在已通过萃取得到粗提总皂苷,另外有3个上过2次柱子的样品,洗脱剂是氯仿-甲醇 梯度洗脱 ,现在想继续分离纯化,在TLC上试验 ,选择怎样的展开剂 ? 我已经试了很多了 ,都不行,求高人指点,谢过。
同问---------------
BAW系统不错
能不能说说 BAW系统是具体怎么用的啊
站内搜索BAW就有答案了
既然是皂苷的分离,一般就要在展开剂中加入水,一来增大了极性,二来有一定的分配色谱的作用,如果水饱和了就是分配色谱了。
BAW系统是 正丁醇:醋酸:水(4:1:5)取上层,或者(4:1:1)直接混匀即可
另外做柱层析分离的话,可以尝试以下系统
氯仿:甲醇:水(CMW)(50:10:1)、(30:10:2)(65:35:10下层),乙酸乙酯:乙醇:水(EEW)(50:10:2)等等,具体条件需要变换比例,个人比较喜欢CMW,我现在就用CMW(65:35:10)
还有给你推荐一本书:中药化学成分提取分离手册
网上DOWN最方便了,如果找不到的话跟我联系,QQ:41929541
e-mail:lxtx3223@163.com
都不行啊,都分不开。
慢慢来吧,好像没有什么好的方法了。
或者制备液相
我前些天跑的柴胡皂苷也是用的这些系统,效果不错!特别是CMW(65:35:10下层)。当然EEW(15:2:1)也可以。
为什么各位高人说可以跑出来的,我试了,有的没跑,有的跑出来是在点样点上方一小段(竖着的椭圆形),有的就出现了一个点,根本就没有分段的,难道是展距或者其它什么问题?求高人指点。我用的就是普通的25mm*75mm的载玻片,10%香草醛+浓硫酸显色,烘烤。
感谢回帖的朋友,我明天换20%硫酸乙醇显色,再去试试你们提供的系统。
问下楼上的,你说的效果不错是怎样的?让我想象一下,谢了。
我用CMW(65:35:10)。冰箱中精制过夜,取下层!可以把柴胡皂苷a、d都能分开!Rf值0.4左右!
今天用的是20%的硫酸乙醇显色剂,然后烘烤,硅胶板用的是青岛海洋化工厂的硅胶G,主要还是试了众人说的经典的系统。氯仿-甲醇-水=13:7:2下层,有一个样炮出来2个点 其余的样都还是一个点或者一小段阿。
正丁醇-乙酸-水=4:1:5上层 总皂苷(未上过柱子的)跑出来隐约可见3小段,其余上过柱子的样品,跑出来都是一小段,接近点,效果是比自己铺的板好些, 怎么看别人跑皂苷有七八个点 我这是不是还是没跑开?
各位,给出出主意吧
楼上的朋友,我今天回来之前也静置了一个分液漏斗就是CMW用的是26:14:4。打算明天再去试试 你的东西在薄层上就能跑出来2个点柴胡皂苷a、d么?然后你上柱子怎样的比例梯度洗脱?
氯仿-甲醇-水=26:14:4下层 是昨天配的静置过夜了的,今天用的,效果比昨天的好些,总皂苷(未上过柱子的)跑出来有4个点,但是分的不开,紧挨着的,再往上就看不出来了,其余的上过2次柱子的5个样,都跑出来2个点,位置都差不多,2个点的Rf分别是0.16 和 0.22,我只跑出来2个点,现在能上柱了么?展开剂的梯度怎么设置呐?
请各位指点一下吧,么人管了?!
换乙酸乙酯乙醇水系统细分 效果好些
乙酸乙酯乙醇水系统细分什么比例?还有,我现在想从总皂苷(浸膏)开始分,用CMW=65:35:10系统, 这个系统是分层的,我怎么设置梯度?
从8:2:1一直到8:3:3,我现在就用这个系统细分,效果不错~
那我今天用8:2:1,8:3:3,去跑薄层试试效果,了。
同问---------------
BAW系统不错
能不能说说 BAW系统是具体怎么用的啊
站内搜索BAW就有答案了
既然是皂苷的分离,一般就要在展开剂中加入水,一来增大了极性,二来有一定的分配色谱的作用,如果水饱和了就是分配色谱了。
BAW系统是 正丁醇:醋酸:水(4:1:5)取上层,或者(4:1:1)直接混匀即可
另外做柱层析分离的话,可以尝试以下系统
氯仿:甲醇:水(CMW)(50:10:1)、(30:10:2)(65:35:10下层),乙酸乙酯:乙醇:水(EEW)(50:10:2)等等,具体条件需要变换比例,个人比较喜欢CMW,我现在就用CMW(65:35:10)
还有给你推荐一本书:中药化学成分提取分离手册
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e-mail:lxtx3223@163.com
都不行啊,都分不开。
慢慢来吧,好像没有什么好的方法了。
或者制备液相
我前些天跑的柴胡皂苷也是用的这些系统,效果不错!特别是CMW(65:35:10下层)。当然EEW(15:2:1)也可以。
为什么各位高人说可以跑出来的,我试了,有的没跑,有的跑出来是在点样点上方一小段(竖着的椭圆形),有的就出现了一个点,根本就没有分段的,难道是展距或者其它什么问题?求高人指点。我用的就是普通的25mm*75mm的载玻片,10%香草醛+浓硫酸显色,烘烤。
感谢回帖的朋友,我明天换20%硫酸乙醇显色,再去试试你们提供的系统。
问下楼上的,你说的效果不错是怎样的?让我想象一下,谢了。
我用CMW(65:35:10)。冰箱中精制过夜,取下层!可以把柴胡皂苷a、d都能分开!Rf值0.4左右!
今天用的是20%的硫酸乙醇显色剂,然后烘烤,硅胶板用的是青岛海洋化工厂的硅胶G,主要还是试了众人说的经典的系统。氯仿-甲醇-水=13:7:2下层,有一个样炮出来2个点 其余的样都还是一个点或者一小段阿。
正丁醇-乙酸-水=4:1:5上层 总皂苷(未上过柱子的)跑出来隐约可见3小段,其余上过柱子的样品,跑出来都是一小段,接近点,效果是比自己铺的板好些, 怎么看别人跑皂苷有七八个点 我这是不是还是没跑开?
各位,给出出主意吧
楼上的朋友,我今天回来之前也静置了一个分液漏斗就是CMW用的是26:14:4。打算明天再去试试 你的东西在薄层上就能跑出来2个点柴胡皂苷a、d么?然后你上柱子怎样的比例梯度洗脱?
氯仿-甲醇-水=26:14:4下层 是昨天配的静置过夜了的,今天用的,效果比昨天的好些,总皂苷(未上过柱子的)跑出来有4个点,但是分的不开,紧挨着的,再往上就看不出来了,其余的上过2次柱子的5个样,都跑出来2个点,位置都差不多,2个点的Rf分别是0.16 和 0.22,我只跑出来2个点,现在能上柱了么?展开剂的梯度怎么设置呐?
请各位指点一下吧,么人管了?!
换乙酸乙酯乙醇水系统细分 效果好些
乙酸乙酯乙醇水系统细分什么比例?还有,我现在想从总皂苷(浸膏)开始分,用CMW=65:35:10系统, 这个系统是分层的,我怎么设置梯度?
从8:2:1一直到8:3:3,我现在就用这个系统细分,效果不错~
那我今天用8:2:1,8:3:3,去跑薄层试试效果,了。