各位老师：
我第一次做柱层析，买了Sephadex LH－20
样品溶解在DMSO里面，浓度有20mg/ml
请问能用少量DMSO上样吗（比如1ml）？柱直径：高度为1：15，用甲醇和水的体系洗脱，行得通吗？
样品是用甲醇提取的天然产物



现在简直是一头雾水～
我曾经用吡啶溶解样品后上样。用1ml DMSO应该也可以。只是，既然甲醇可以溶解，为何不用甲醇上样？
柱子高度最好在60cm以上，直径只影响你的上样量。
径高比基本上没有什么意义。
因为这些用DMSO溶解的样品是之前做活性测试的，量很大

新的，重新提取的样品是用甲醇溶解的，但是样比较少

大家

回楼上，柱子要在60cm以上吗？
我在别的地方看到直径比高度1：15就可以啊

我订的柱子是1：50的。

难道还要重新订一根？！
sephadex 使用的时候一般是长柱子好，而且它的载样量不大，上大量的样容易超载。
DMSO溶解上样也可以，只是会有很大一部分样品会随DMSO先流出，达不到分离的目的。所以建议先把甲醇那部分分了。：）
1：50的柱子不可能内径只有1cm吧，稍微粗点的柱子都会比较长。

不过Sephadex LH－20的分离模式很特殊，在SEC和分配层析模式下，需要很长的柱子保证柱效，如果是吸附层析，30cm就够，不过用的很少。
看你的目标物的大小了，一般DMSO会先出来，但是要是目标分子比较大，如糖苷就难讲了。可以用ods去DMSO。
大家，我已经用冷冻干燥把DMSO去除了
我要分的是小分子多肽啊，1000左右
1:50是我定制的