最近在分离一个羟基比较多的酚性物质，基本上HPLC显示的纯度差不多了，只是还有个极性比它小的杂质不太好弄，目前所用的展开剂在薄层上显示两个点有大概3~4毫米的间距，可是柱层析上下来就是会交叉那么一两瓶，而且里面目标物的含量还比较大。
不知道有没有人碰到过这种情况没有，可否指点指点，感激不尽！
持续请教！！！
“柱层析上下来就是会交叉那么一两瓶“，所用是何柱阿？如是硅胶吸附柱色谱，是否是梯度洗脱时，极性增大的太快啊？
”薄层上显示两个点有大概3~4毫米的间距”,rf值是比较接近的，不知其分子量大小如何，试试凝胶柱色谱？
在此借机请教一下：在分离羟基比较多的酚性物质时，由于物质易氧化，有什么方法可以避免或减少其氧化吗？
先要感谢xgl81625兄的赐教！
我用的就是硅胶柱层析，不是梯度洗脱，就是一个溶剂洗到底，本来在目标物的上方还有个杂质，但是离得比较远，就分掉了，就是这个比较近的，总是粘着一些，还混着不少的目标物，头大！
另外，目前为止我也是发现在后期浓缩的时候，加入极性比较大的溶剂的时候感觉加速了它的氧化，溶剂极性比较小时就没有那么厉害，个人观点，不知是否正确。
不用客气，大家互相探讨吧：
那就调小极性试一下，用TLC把目标物的 rf值调到0.2左右，用比这个展开剂极性稍小的溶剂作为起始洗脱液，配合TLC检识，逐渐增大洗脱液极性试试。
关于极性大小对氧化程度的影响，我也有类似的同感，但原因我说不上来，会不会是和极性大了溶解度高了有关。
我也在分离两个极性较大而且非常相近的物质，不仔细看根本看不出是两个物质。极性又特别大，量也就几十毫克。最后选择凝胶柱分离，效果还可以，能分开一部分。建议试下。
我的原料倒不成问题，只是要上大生产，凝胶柱的成本是个问题，目前把流动向的极性往下调了调，再试，希望能把杂质拖掉。
可以采用聚酰胺柱层析。选用适当浓度乙醇洗脱。
我在做一个中药中黄酮苷单体的分离 ，硅胶柱（HPLC检测洗脱液）
发现用一个比例洗到底会有比较多的杂质也共洗脱下来，第一遍洗脱目标峰前后都有2、3个杂质峰，（用HPLC检测）。现在我的解决策略是继续分离纯化：
先用小极性（极性比第一次时候小）洗脱一段时间，再用中极性的洗脱目标峰，最后用再大点极性的洗脱剂，HPLC检测，合并相同部分。
建议可以试试看。
ps：我本来想第一遍过后就用聚酰胺柱纯化的，可是导师说还是用硅胶柱吧，聚酰胺柱你还要继续摸条件，比较浪费时间。
但是个人认为，硅胶柱+聚酰胺柱分离黄酮等多羟基化合物效果还是很好的！
希望多交流交流
做制备啊
我在做一个中药中黄酮苷单体的分离 ，硅胶柱（HPLC检测洗脱液）
发现用一个比例洗到底会有比较多的杂质也共洗脱下来，第一遍洗脱目标峰前后都有2、3个杂质峰，（用HPLC检测）。现在我的解决策略是继续分离纯化：
先用小极性（极性比第一次时候小）洗脱一段时间，再用中极性的洗脱目标峰，最后用再大点极性的洗脱剂，HPLC检测，合并相同部分。
建议可以试试看。
ps：我本来想第一遍过后就用聚酰胺柱纯化的，可是导师说还是用硅胶柱吧，聚酰胺柱你还要继续摸条件，比较浪费时间。
但是个人认为，硅胶柱+聚酰胺柱分离黄酮等多羟基化合物效果还是很好的！
希望多交流交流
不知道有没有人碰到过这种情况没有，可否指点指点，感激不尽！
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“柱层析上下来就是会交叉那么一两瓶“，所用是何柱阿？如是硅胶吸附柱色谱，是否是梯度洗脱时，极性增大的太快啊？
”薄层上显示两个点有大概3~4毫米的间距”,rf值是比较接近的，不知其分子量大小如何，试试凝胶柱色谱？
在此借机请教一下：在分离羟基比较多的酚性物质时，由于物质易氧化，有什么方法可以避免或减少其氧化吗？
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我用的就是硅胶柱层析，不是梯度洗脱，就是一个溶剂洗到底，本来在目标物的上方还有个杂质，但是离得比较远，就分掉了，就是这个比较近的，总是粘着一些，还混着不少的目标物，头大！
另外，目前为止我也是发现在后期浓缩的时候，加入极性比较大的溶剂的时候感觉加速了它的氧化，溶剂极性比较小时就没有那么厉害，个人观点，不知是否正确。
不用客气，大家互相探讨吧：
那就调小极性试一下，用TLC把目标物的 rf值调到0.2左右，用比这个展开剂极性稍小的溶剂作为起始洗脱液，配合TLC检识，逐渐增大洗脱液极性试试。
关于极性大小对氧化程度的影响，我也有类似的同感，但原因我说不上来，会不会是和极性大了溶解度高了有关。
我也在分离两个极性较大而且非常相近的物质，不仔细看根本看不出是两个物质。极性又特别大，量也就几十毫克。最后选择凝胶柱分离，效果还可以，能分开一部分。建议试下。
我的原料倒不成问题，只是要上大生产，凝胶柱的成本是个问题，目前把流动向的极性往下调了调，再试，希望能把杂质拖掉。
可以采用聚酰胺柱层析。选用适当浓度乙醇洗脱。
我在做一个中药中黄酮苷单体的分离 ，硅胶柱（HPLC检测洗脱液）
发现用一个比例洗到底会有比较多的杂质也共洗脱下来，第一遍洗脱目标峰前后都有2、3个杂质峰，（用HPLC检测）。现在我的解决策略是继续分离纯化：
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建议可以试试看。
ps：我本来想第一遍过后就用聚酰胺柱纯化的，可是导师说还是用硅胶柱吧，聚酰胺柱你还要继续摸条件，比较浪费时间。
但是个人认为，硅胶柱+聚酰胺柱分离黄酮等多羟基化合物效果还是很好的！
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我在做一个中药中黄酮苷单体的分离 ，硅胶柱（HPLC检测洗脱液）
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但是个人认为，硅胶柱+聚酰胺柱分离黄酮等多羟基化合物效果还是很好的！
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