实验参考：
用次黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶反应系统中生成的超氧阴离子自由基与羟胺反应形j成亚硝酸盐,其后与对氨基苯磺酸和N-1-萘-乙二胺发生颜色反应,在550 nm 可检测出亚硝酸盐的生成量,再转换成超氧阴离子自由基的生成量。取315 mmol·L - 1次黄嘌呤溶液100μl ,50 mmol·L - 1盐酸羟胺溶液100 μl ,不同浓度梯
度抗坏血酸和炮制品溶液100μl ,50 mmol·L - 1磷酸缓冲液(pH810) 700μl 于试管中,混匀后在37 ℃恒温水浴预热5 min ,加入01016 U 黄嘌呤氧化酶后继续在37 ℃水浴中孵育30 min ,取出冷却,加入溶于1136 mol·L - 1冰醋酸溶液中的1173 mmol·L - 1对氨基苯磺酸和19129μmol·L - 1N-1-萘-乙二胺2 ml ,混匀后在室温下避光反应,并在550 nm 处测定吸收度。
我按上面的步骤做下来之后怎么没有 结果呢？
我的次黄嘌呤溶液，N-1-萘-乙二胺，对氨基苯磺酸是超声溶解的；
酶的配制是取1.6mg的酶（规格：0.5U /mg）定容于50ml容量瓶，得到0.016U/ml的溶液。固体酶是保存在-20度，酶溶液是在0-4度保存的。
到底是哪里除了问题呢？请大家帮我分析一下，！
用次黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶反应系统中生成的超氧阴离子自由基与羟胺反应形j成亚硝酸盐,其后与对氨基苯磺酸和N-1-萘-乙二胺发生颜色反应,在550 nm 可检测出亚硝酸盐的生成量,再转换成超氧阴离子自由基的生成量。取315 mmol·L - 1次黄嘌呤溶液100μl ,50 mmol·L - 1盐酸羟胺溶液100 μl ,不同浓度梯
度抗坏血酸和炮制品溶液100μl ,50 mmol·L - 1磷酸缓冲液(pH810) 700μl 于试管中,混匀后在37 ℃恒温水浴预热5 min ,加入01016 U 黄嘌呤氧化酶后继续在37 ℃水浴中孵育30 min ,取出冷却,加入溶于1136 mol·L - 1冰醋酸溶液中的1173 mmol·L - 1对氨基苯磺酸和19129μmol·L - 1N-1-萘-乙二胺2 ml ,混匀后在室温下避光反应,并在550 nm 处测定吸收度。
我按上面的步骤做下来之后怎么没有 结果呢？
我的次黄嘌呤溶液，N-1-萘-乙二胺，对氨基苯磺酸是超声溶解的；
酶的配制是取1.6mg的酶（规格：0.5U /mg）定容于50ml容量瓶，得到0.016U/ml的溶液。固体酶是保存在-20度，酶溶液是在0-4度保存的。
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